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摘要:目的: 探讨应用薄层层析(TLC)法鉴别区分中药生品与炮制品的可行性。方法:筛选临床常用5种中药材(地黄、何首乌、大黄、黄芩、黄精生品、炮制品)作为研究对象,采用TLC法进行鉴别区分,常规方法制备试品溶液。对照品选用5-羟甲基糠醛(5-HMF)、硅胶G层析板,展开剂采用石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(1:1),后对试品喷15%α-萘酚乙醇溶液,水浴90℃至斑点完全显色,于日光下观察,并对图谱进行制表分析。结果 地黄、何首乌、大黄、黄精在于对照品色谱相应位置比较中,炮制品存在相同颜色的斑点,生品无相同颜色斑点,黄芩生品炮制品均显现相同颜色的斑点。结论:应用TLC鉴别法可准确鉴别部分中药生品与炮制品。
关键词:TLC法;中药生品;炮制品
【中图分类号】R943.1 【文献标识码】A【文章编号】1002-3763(2014)02-0004-01
中药的化学成分比较复杂,其经过炮制后药性会发生改变,部分中药须经炮熟后,才可表现出其特定的药理效果[1]。通常炮制品可根据生品的薄层层析(TLC)法进行鉴别,研究发现,生地黄炮制后可检测出5-羟甲基糠醛(5-HMF),而单纯检测生地黄中不含5-HMF,在何首乌的生品与炮制品TLC鉴别中也可根据5-HMF进行鉴别[2]。本次实验探讨应用TLC法以5-HMF为鉴别标准是否可准确区分中药生品与炮制品,对临床常用5种中药材进行色谱分析,比较其炮制品与生品的色谱斑点区别。现报道如下:
1资料与方法
1.1 材料与仪器
筛选常用5种中药地黄、何首乌、大黄、黄芩、黄精作为研究对象,所有中药材根据《中华人民共和国药典》进行炮制[3]。对照品由实验室提供熟品何首乌中提取纯度95%以上的5-HMF,硅胶G层析板、石油醚(60~90℃)、乙酸乙酯、15%α-萘酚乙醇均采用市场标准品(北京化学试剂公司)。应用薄层扫描成像系统(CAMAG)进行色谱分析。
1.2 实验方法
将5-HMF混合95%乙醇制成50%浓度的5-HMF溶液,作为对照品。取5种中药的生品与炮制品混合40ml 95% 乙醇超声处理后进行过滤蒸干,滤渣混合无菌蒸馏水5ml,应用蒸馏水30ml洗脱过聚酰胺柱,采集洗脱液后低温低压蒸干(40℃以下),结晶再次混合95%乙醇溶解作为试品。将对照品与试品滴加至硅胶G层析板,展开剂石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(1:1)进行标本展开,干燥后喷以15%α-萘酚乙醇溶液进行加热直至斑点完全显色,日光下进行观察色谱。每种药材进行多次TLC鉴别,用以组内比较消除误差。
2结果
生地黄与熟地黄的TLC图谱比较见图1。通过图1可发现生地黄与熟地黄检测结果存在差异,熟地黄与对照品具有相同颜色斑点,生地黄不具有相同颜色斑点。
3 讨论
薄层层析法(TLC)是一种分离混合物的技术,将被检溶液滴加在具有吸附作用固定相的硅胶G层析板上,溶剂或流动相因毛细现象而发生向上移动,溶剂中不同的成分、分析物其在TLC硅胶G层析板上的移动速度不同,可达到对被检溶剂的分离比较目的[3]。中药成分极为复杂,而且中药材需经过炮生为熟才可发挥其不同的药理作用,其生品与炮制品的药效差异较为显著,如生地黄可用于热病舌绛烦渴,而熟地黄却具有增强凉血止血功效。故准确的评价中药方剂中的药材生熟将直接影响中药的治疗效果。
文献报道,部分中药材炮制后可在其炮制品中检测到5-羟甲基糠醛(5-HMF),为曼拉德反应产物之一,曼拉德反应是氨基化合物与还原糖化合物发生复杂的化合反应中,其广泛存在于中药的煎煮、炮制加热中,特别是含糖中药材[4]。而通过对本次实验解果分析可知,地黄、何首乌、大黄、黄精在于对照品色谱相应位置比较中,炮制品存在相同颜色的斑点,生品无相同颜色斑点,黄芩生品炮制品均显现相同颜色的斑点。在本次实验中,黄芩的炮制品中未发现5-HMF,但并不能确定此标本为黄芩生品,因曼拉德反应主要受氨基酸种类、糖、溶液、PH、温度等影像,并且中药的炮制手法较多,炮制时间不一,可能对5-HMF检测结果存在影响,在实验中针对同一种药材组内进行检测5-HMF可发现,炮制时间、溶液浓度、温度的不同,虽结果均可检测到相同颜色的斑点,但斑点大小存在差异,提示药材炮制后的5-HMF浓度可与炮制手法、时间及其他影像因素有关。因此,TLC可初步鉴别区分部分中药的生品与炮制品,而对于不能够准确区分的药材可应用多种方法综合检测,区分其生品与炮制品,以提高治疗效果。
参考文献:
[1]单学健.常用中药生品、炮制品功效差异探讨[J]. 中医药导报, 2012,18(7):87-88.
[2]刘振丽,宋志前, 巢志茂, 等.何首乌生品与炮制品薄层层析鉴别方法研究[J].中国中医药信息杂志, 2009,16(3):41-42.
[3]刘振丽, 陈其锋, 宋志前, 等.TLC鉴别方法区别部分中药生品与炮制品的研究[J]. 中药材, 2008, 31(9):1313-1314.
[4]黎进平.中药TLC法鉴别检验中的几点体会[J].中国药师,2006,9(3):276-277.
关键词:TLC法;中药生品;炮制品
【中图分类号】R943.1 【文献标识码】A【文章编号】1002-3763(2014)02-0004-01
中药的化学成分比较复杂,其经过炮制后药性会发生改变,部分中药须经炮熟后,才可表现出其特定的药理效果[1]。通常炮制品可根据生品的薄层层析(TLC)法进行鉴别,研究发现,生地黄炮制后可检测出5-羟甲基糠醛(5-HMF),而单纯检测生地黄中不含5-HMF,在何首乌的生品与炮制品TLC鉴别中也可根据5-HMF进行鉴别[2]。本次实验探讨应用TLC法以5-HMF为鉴别标准是否可准确区分中药生品与炮制品,对临床常用5种中药材进行色谱分析,比较其炮制品与生品的色谱斑点区别。现报道如下:
1资料与方法
1.1 材料与仪器
筛选常用5种中药地黄、何首乌、大黄、黄芩、黄精作为研究对象,所有中药材根据《中华人民共和国药典》进行炮制[3]。对照品由实验室提供熟品何首乌中提取纯度95%以上的5-HMF,硅胶G层析板、石油醚(60~90℃)、乙酸乙酯、15%α-萘酚乙醇均采用市场标准品(北京化学试剂公司)。应用薄层扫描成像系统(CAMAG)进行色谱分析。
1.2 实验方法
将5-HMF混合95%乙醇制成50%浓度的5-HMF溶液,作为对照品。取5种中药的生品与炮制品混合40ml 95% 乙醇超声处理后进行过滤蒸干,滤渣混合无菌蒸馏水5ml,应用蒸馏水30ml洗脱过聚酰胺柱,采集洗脱液后低温低压蒸干(40℃以下),结晶再次混合95%乙醇溶解作为试品。将对照品与试品滴加至硅胶G层析板,展开剂石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯(1:1)进行标本展开,干燥后喷以15%α-萘酚乙醇溶液进行加热直至斑点完全显色,日光下进行观察色谱。每种药材进行多次TLC鉴别,用以组内比较消除误差。
2结果
生地黄与熟地黄的TLC图谱比较见图1。通过图1可发现生地黄与熟地黄检测结果存在差异,熟地黄与对照品具有相同颜色斑点,生地黄不具有相同颜色斑点。
3 讨论
薄层层析法(TLC)是一种分离混合物的技术,将被检溶液滴加在具有吸附作用固定相的硅胶G层析板上,溶剂或流动相因毛细现象而发生向上移动,溶剂中不同的成分、分析物其在TLC硅胶G层析板上的移动速度不同,可达到对被检溶剂的分离比较目的[3]。中药成分极为复杂,而且中药材需经过炮生为熟才可发挥其不同的药理作用,其生品与炮制品的药效差异较为显著,如生地黄可用于热病舌绛烦渴,而熟地黄却具有增强凉血止血功效。故准确的评价中药方剂中的药材生熟将直接影响中药的治疗效果。
文献报道,部分中药材炮制后可在其炮制品中检测到5-羟甲基糠醛(5-HMF),为曼拉德反应产物之一,曼拉德反应是氨基化合物与还原糖化合物发生复杂的化合反应中,其广泛存在于中药的煎煮、炮制加热中,特别是含糖中药材[4]。而通过对本次实验解果分析可知,地黄、何首乌、大黄、黄精在于对照品色谱相应位置比较中,炮制品存在相同颜色的斑点,生品无相同颜色斑点,黄芩生品炮制品均显现相同颜色的斑点。在本次实验中,黄芩的炮制品中未发现5-HMF,但并不能确定此标本为黄芩生品,因曼拉德反应主要受氨基酸种类、糖、溶液、PH、温度等影像,并且中药的炮制手法较多,炮制时间不一,可能对5-HMF检测结果存在影响,在实验中针对同一种药材组内进行检测5-HMF可发现,炮制时间、溶液浓度、温度的不同,虽结果均可检测到相同颜色的斑点,但斑点大小存在差异,提示药材炮制后的5-HMF浓度可与炮制手法、时间及其他影像因素有关。因此,TLC可初步鉴别区分部分中药的生品与炮制品,而对于不能够准确区分的药材可应用多种方法综合检测,区分其生品与炮制品,以提高治疗效果。
参考文献:
[1]单学健.常用中药生品、炮制品功效差异探讨[J]. 中医药导报, 2012,18(7):87-88.
[2]刘振丽,宋志前, 巢志茂, 等.何首乌生品与炮制品薄层层析鉴别方法研究[J].中国中医药信息杂志, 2009,16(3):41-42.
[3]刘振丽, 陈其锋, 宋志前, 等.TLC鉴别方法区别部分中药生品与炮制品的研究[J]. 中药材, 2008, 31(9):1313-1314.
[4]黎进平.中药TLC法鉴别检验中的几点体会[J].中国药师,2006,9(3):276-277.