同源重组快速构建百合LCHS2基因RNAi表达载体及其鉴定

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为探讨CHS基因的下调表达对花朵着色的影响以及为百合观赏性状遗传改良提供技术支持。利用基于同源重组原理的Gateway技术,根据课题组从东方百合‘索邦’分离的LCHS2基因序列(Genbank登录号:GQ483376)和pENTR/D—TOPO载体要求,设计上游5’端添加’CACC’的一对特异引物,PCR扩增获得636bp的干扰片段。通过TOPO克隆,将该片段克隆入载体pENTR/D—TOPO构建入门克隆载体pENTR/D—CHS,测序结果显示,与原序列同源性为100%。再经过LR反应使pENTR/D—C
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