【摘 要】
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为了探究芽殖酵母蛋白Sik1在有丝分裂纺锤体定位中的功能,利用同源重组技术将SIK1的内源启动子替换成GAL1启动子,得到基因组位点过表达SIK1的菌株,同时使菌株表达GFP-Tub1,以便观察纺锤体;接着在12℃低温条件下培养细胞以促进双核细胞的产生,细胞经乙醇固定、DAPI染色后在荧光显微镜下观察细胞核分裂及纺锤体定位;最后检测SIK1过表达对细胞生存能力的影响.结果表明:过表达Sik1会干扰纺锤体定位,但对细胞核迁移没有明显影响.在16℃低温胁迫条件下,过表达Sik1降低了纺锤体定位突变体kar9Δ
【机 构】
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中南民族大学生命科学学院&武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室&生物技术国家民委重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(31401155),中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(CZY18021)。
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为了探究芽殖酵母蛋白Sik1在有丝分裂纺锤体定位中的功能,利用同源重组技术将SIK1的内源启动子替换成GAL1启动子,得到基因组位点过表达SIK1的菌株,同时使菌株表达GFP-Tub1,以便观察纺锤体;接着在12℃低温条件下培养细胞以促进双核细胞的产生,细胞经乙醇固定、DAPI染色后在荧光显微镜下观察细胞核分裂及纺锤体定位;最后检测SIK1过表达对细胞生存能力的影响.结果表明:过表达Sik1会干扰纺锤体定位,但对细胞核迁移没有明显影响.在16℃低温胁迫条件下,过表达Sik1降低了纺锤体定位突变体kar9Δ
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-1,PS浓度为0.5 mmol·L
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-、NO
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