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目的
失重环境对机体多个系统产生影响,最为重要的是失重性骨质丢失,且目前尚无有效对抗方法。本研究探讨失重环境是否通过影响细胞氧化应激水平导致成骨细胞凋亡增加,为进一步阐述失重性骨质丢失的细胞学机制提供实验支持。
方法利用2D回转器模拟失重条件培养前成骨细胞MC3T3-E1;利用Western blot、聚合酶链式反应检测MC3T3-E1细胞在模拟失重后凋亡相关分子的改变;用流式技术检测模拟失重后氧化应激相关指标活性氧(ROS)的变化,并利用ROS的激动剂以及抑制剂在正常重力以及模拟失重环境下,分别将ROS进行过表达与抑制,观察凋亡的表达变化情况。
结果①与对照组相比,模拟失重组ROS增多,细胞凋亡增加,凋亡相关分子Bax、Bcl-2和Caspase-3的蛋白以及mRNA表达发生相应改变。②与对照组相比,在正常重力环境过表达ROS后细胞凋亡增加,凋亡相关分子的蛋白以及mRNA表达发生相应改变。③与对照组相比,在模拟失重环境下抑制ROS表达显示前成骨细胞凋亡减少,凋亡相关分子的mRNA以及蛋白表达发生相应改变。
结论2D回转器模拟的失重环境可通过影响ROS表达进而导致MC3T3-E1细胞的凋亡。