飞蝗核受体LmE75D的表达和功能初步分析

来源 :山西大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:buzadi3
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E75是蜕皮激素信号通路关键因子,在昆虫蜕皮发育过程中发挥重要作用.通过搜索飞蝗转录组数据库,获得LmE75D基因cDNA序列(GenBank登录号为MN584735),开放阅读框长度为1971 bp,编码656个氨基酸,利用实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,RT-qPCR)方法研究LmE75D的时空表达,表明LmE75D在体壁、前肠、中肠等多个组织中表达,并且在4-5龄每一天均衡表达.利用RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)对LmE75的生物学功能进行探讨,对4龄第1天的飞蝗若虫进行双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)注射,注射dsLmE75后LmE75的表达较对照组显著下调,当对照组飞蝗蜕皮发育至5龄若虫时,注射dsLmE75组67.5%若虫脊线未开裂于蜕皮前死亡,32.5%若虫脊线开裂蜕皮失败死亡.体壁苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin stain-ing,HE染色法)的结果表明,注射dsLmE75后的飞蝗体壁出现皮层溶离现象并伴有旧表皮降解和新表皮合成.透射电镜(Transmission electron microscopy,TEM)结果显示,相比对照组,注射dsLmE75后新表皮合成厚度显著减少.文章初步阐明了核受体E75在飞蝗蜕皮过程中的作用机制,为以核受体因子为新的害虫防治靶标筛选提供理论依据.
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