【摘 要】
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目的利用C/EBPβ具有DNA结合活性的特点,建立检测核转录因子C/EBPβ的方法.方法研究特异的寡核苷酸序列,建立分子探针标记、拟合补偿曲线并研究DNA分子与转录因子特异结合的
【机 构】
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首都医科大学附属北京友谊医院临床检验中心,北京大学人民医院检验科
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目的利用C/EBPβ具有DNA结合活性的特点,建立检测核转录因子C/EBPβ的方法.方法研究特异的寡核苷酸序列,建立分子探针标记、拟合补偿曲线并研究DNA分子与转录因子特异结合的相关实验参数.结果γ-32P-ATP为20 pmol, C/EBPβ寡核苷酸浓度为4 pmol 时,分子探针活性高,掺和效果好;活性变化回归拟合呈线性关系,r2=0.975;应用此研究体系参数可检测到0.5 μg的核转录因子DNA结合活性,C/EBPβ条带和未结合寡核苷酸分子探针的游离带清晰、特异.结论此方法特异性好,可用于鉴定特定基因调控序列中是否存在C/EBPβ结合位点或细胞核蛋白中是否存在C/EBPβ以及C/EBPβ对特定转录过程的调控作用.
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