【摘 要】
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工业化大规模发酵、复性和纯化突变型人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSFa）,并测定其体外生物学活性。利用定点突变和DNA重组技术获得突变型G-CSF（rhG-CSFa）。通过40 L发酵罐发酵基因
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院苏州方舟生物医药研发中心,苏州方舟基因药业有限公司
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工业化大规模发酵、复性和纯化突变型人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSFa）,并测定其体外生物学活性。利用定点突变和DNA重组技术获得突变型G-CSF（rhG-CSFa）。通过40 L发酵罐发酵基因工程菌株获得rhG-CSFa包涵体,经过一系列透析后,通过离子交换柱和分子排阻层析进行纯化,并使用高效液相色谱技术对纯化后的rhG-CSFa进行纯度分析。利用G-CSF依赖细胞株（M-NFS-60）测定纯化后的rhG-CSFa体外活性效价。结果表明,rhG-CSFa表达量占全菌蛋白的31.2%,通过优化复性条件,
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ue＊M＃’＃dkB4＃＃8＃”专利申请号:00109“7公开号:1278062申请日:00.06.23公开日:00.12.27申请人地址:（100084川C京市海淀区清华园申请人:清华大学发明人:隋森芳文摘:本发明属于生物技