【摘 要】
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目的探讨南瓜蛋白(CUS)诱导人胰腺癌细胞(PANC)-1凋亡的线粒体机制。方法0、2.5、10.0、40.0 mg/L的CUS处理胰腺癌PANC-1 72 h,荧光显微镜和流式细胞仪观察线粒体膜电位(ΔΨm)的变化,Western blot检测胞质细胞色素C(Cyt-C)的含量变化和细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-9(Caspase-9)和Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-
【机 构】
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350001福州,福建医科大学附属协和医院普外科,350001福州,福建医科大学附属协和医院普外科,中国科学院福建物质结构研究所结构化学国家重点实验室,福建医科大学药学院
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目的探讨南瓜蛋白(CUS)诱导人胰腺癌细胞(PANC)-1凋亡的线粒体机制。
方法0、2.5、10.0、40.0 mg/L的CUS处理胰腺癌PANC-1 72 h,荧光显微镜和流式细胞仪观察线粒体膜电位(ΔΨm)的变化,Western blot检测胞质细胞色素C(Cyt-C)的含量变化和细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-9(Caspase-9)和Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)蛋白的表达水平。
结果0、2.5、10.0、40.0 mg/L CUS处理PANC-1 72 h 后,ΔΨm逐渐下降,分别为167.23±8.27、123.56±7.26、83.25±5.36和40.45±5.87,差异有统计学意义(P< 0.05);Western blot结果显示线粒体Cyt-C释放到细胞质的量逐渐增加,灰度值分别为0.29±0.05、1.69±0.35、1.87±0.40、2.47±0.32(P< 0.05);Caspase-9、Caspase-3和bax蛋白的表达逐渐增强,且其作用呈剂量依赖性(Caspase-9灰度值分别为0.15±0.03、0.19±0.05、0.49 ±0.09、0.89±0.08,P< 0.05;Caspase-3灰度值分别为0.88±0.08、1.81±0.19、2.36±0.38、2.92 ±0.24,P<0.05;bax灰度值分别为0.79±0.18、1.66±0.31、2.61±0.41、3.67±0.24,P< 0.05); 而bcl-2蛋白表达无明显变化(bcl-2灰度值分别为0.88±0.08、0.82±0.18、0.84±0.04、0.82±0.13, P> 0.05)。
结论线粒体途径在CUS诱导胰腺癌细胞凋亡中起重要作用,其机制可能是CUS通过激活促凋亡蛋白bax表达增加,降低ΔΨm,促进线粒体Cyt-C的释放,从而激活Caspase系列酶,诱导胰腺癌细胞凋亡。
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