凝血酶调节蛋白植物凝集素样片段的原核表达及抗体制备

来源 :中国免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pankun001
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的 :制备凝血酶调节蛋白 (thrombomodulin ,TM)抗体。方法 :原核表达目的蛋白 ,将表达的融合蛋白纯化后免疫小鼠。以EVC30 4包板的cell ELISA检测抗体滴度 ,用Westernblot和免疫组化鉴定抗体特异性。结果 :目的蛋白在大肠杆菌中大量表达形成包涵体 ,将表达蛋白纯化并复性后免疫小鼠 ,3次免疫后得抗体效价为 1∶4 0 0 0 ,经加强免疫后抗体效价达到1∶80 0 0 ;特异性较好。结论 :在天然TM提取纯化困难的情况下 ,通过原核表达目的蛋白制备抗体是可行的 Objective: To prepare thrombomodulin (TM) antibody. Methods: Prokaryotic expression of the target protein, the fusion protein was purified after immunization of mice. Antibody titers were detected by cell ELISA with 4-kit EVC30 4-kit and antibody specificity by Western blot and immunohistochemistry. Results: The target protein was highly expressed in E. coli to form inclusion bodies. The expressed protein was purified and renatured and then the mice were immunized. After 3 immunizations, the antibody titer was 1: 400 and the antibody titer reached 1:80 0 0; better specificity. Conclusion: It is feasible to prepare antibodies by prokaryotic expression of the target protein in the extraction and purification of natural TM
其他文献
【摘 要】长期受到应试教育的影响,受到多年的老的教育模式的影响,造成学生对高中物理的误解,形成这样的观念“高中物理难,难得像座山”。  【关键词】物理;高中;教学;科学素养;提高  《普通高中物理课程标准》中明确规定了高中物理课程的性质:高中物理是普通高中科学学习领域的一门基础课程,与九年制义务教育物理或科学课程相衔接,旨在进一步提高学生的科学素养。并且在《标准》中新课程基本理念部分明确提出,“在
物流在我国作为一门新兴学科,近几年来发展迅猛.降低物流成本一直以来就是企业追求的目标.从物流运作过程着眼,阐述了从原料采购开始到库存管理,以及运输管理和产品销售等各
目的研究补骨脂、白芷、夏枯草、川芎和墨旱莲单味中药提取物对黑素细胞的酪氨酸酶基因和原癌基因c-kit蛋白表达的影响,以及对总蛋白合成的影响.方法采用蛋白印迹法检测了酪
目的总结、探讨Angioguard、PercuSurge装置在冠状动脉介入治疗中的疗效与安全性.方法急性心肌梗死(AMI)患者10例(靶血管在右冠近中段7例,前降支近端3例)及大隐静脉桥血管介
目的研究经内镜置支架内引流对晚期恶性梗阻性黄疸体液免疫、T淋巴细胞亚群及IL-2,IL-6,sIL-2R和TNF的影响。方法选择临床上恶性梗阻性黄疸经十二指肠镜置支架内引流患者共18
目的 探讨交感神经切除后,痉挛肌肉内肌电图、酶及肌纤维结构的改变.方法将20只Wistar大白鼠作成痉挛性模型,分成两组,随机选择1组行颈总动脉周交感神经网剥脱切除及颈上节交感神经切除术,另1组作为对照,于术后第8天用Dantec肌电图仪观察肱三头肌F波幅度.术后第20天切取两组大鼠部分肱三头肌组织,采用(Ellman)爱尔蒙法测定肌组织内乙酰胆碱酯酶活性,在IBAS图像分析仪上观察两组肌组织内快
摘要 为了研究猫外侧膝状体(LGN)细胞多种感受野特性在短时程眼内压升高前后的差异性变化, 采用前房穿刺直接施加眼压的方法, 保持眼内灌注压为30 mmHg(1 mmHg = 1.33322×102 Pa), 胞外记录了猫LGN细胞对同心圆光斑、光环刺激和对高、低空间频率移动光栅刺激的反应. 实验结果表明, 所记录不同类型LGN细胞及感受野不同组分的反应在眼内压升高后都明显下降. 采用同心圆光斑
目的 探讨跨膜信息传导机制在肝硬化并肝肾综合征发病机制中的作用.方法应用40%四氯化碳制备肝硬化动物模型,免疫组织化学方法检测肝硬化大鼠肾小球血管袢和肾小球前小动脉的Ⅰ型1,4,5-三磷酸肌醇受体(IP3R),观察其表达情况.结果肾小球血管袢和肾小球前小动脉Ⅰ型IP3R表达,实验组分别为:4.97±1.34、4.09±1.14,正常大鼠组分别为:2.43±1.67、1.83±1.32,两组之间差异
目的 探讨胎盘滋养细胞E 钙黏附素 (E Cadherin)的异常表达在妊娠期高血压疾病发病中的作用。方法 收集 2 0 0 0年 7月至 2 0 0 1年 11月新疆医科大学附一院 4 0例妊娠期高
目的:探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对大鼠受伤脊髓功能恢复的影响.方法:32只成年Wistar大鼠随机分成对照组和移植组,用改良的Allen′s方法制作脊髓损伤模型(致伤能量75gcm