应用酚提取法纯化孕妇血浆及血清中胎儿游离DNA

来源 :中华医学遗传学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wxa180395
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目的 应用酚提取法以提高纯化孕妇血中胎儿 DNA的浓度 ,并应用套式 PCR技术确定男性胎儿 SRY基因的存在。方法 孕妇血浆和血清 5~ 10 ml采自孕龄为 7~ 38周孕 1产 0的孕妇 2 6名。其中孕男性单胎正常孕妇 18名 ,孕女胎正常孕妇 8名。加入等体积的苯酚∶氯仿∶异戊醇抽提 ,并经冰浴离心 ,所得 DNA应用套式 PCR技术确定男性胎儿 SRY基因的存在。结果 血浆标本在第 1次 PCR扩增后有 12名出现 35 1bp的阳性扩增带。其余 6名在第 2次扩增后出现 2 5 4 bp的阳性扩增带。第 1次扩增确定性别的准确率是 72 .2 % ,第 2次扩增是 10 0 %。血清标本在第 1次扩增后有 9名出现 35 1bp阳性扩增带 ,第 2次有 16名出现 2 5 4 bp阳性扩增带。第 1次扩增确定性别的准确率为 5 0 % ,两次准确率共为 88.9%。同时对 2例 X-连锁遗传病患者 (假性肥大性肌营养不良症和无汗性外胚层发育不良症的患者 )进行了产前性别判断。结论 单纯应用酚提取的方法也可以纯化孕妇血浆及血清中胎儿游离 DNA的浓度 ,可以应用较大量的孕妇血浆及血清进行 DNA提取 ,以获得较高胎儿 DNA的浓度。加用套式 PCR使确定胎儿性别的准确率得到提高。提示可用此方法对有 X-连锁遗传病家族史的患者进行产前性别判断
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