【摘 要】
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以角蛋白酶基因为研究对象,构建毕赤酵母（Pichia pastoris）稳定的高效表达系统。采用PCR方法从枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）B-3中克隆得到角蛋白酶基因kerC,将其构建在毕赤酵
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以角蛋白酶基因为研究对象,构建毕赤酵母（Pichia pastoris）稳定的高效表达系统。采用PCR方法从枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）B-3中克隆得到角蛋白酶基因kerC,将其构建在毕赤酵母表达载体pPICZαA上,得到重组质粒pPICZαA-kerC,转入毕赤酵母X-33中,成功实现了角蛋白酶基因kerC在真核表达系统中的高效表达。重组菌株以体积分数1%的甲醇诱导培养108h后,酶活力可达32.31U/mL,提高了11.15倍。重组酶最适温度为60℃,最适pH值为7.5,反应体系
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