【摘 要】
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目的 探索静电纺丝技术制备的有序rGO/PLCL支架对hiPSC-CPC心肌分化的影响.方法 采用静电纺丝技术制备有序rGO/PLCL支架.使用扫描电镜观察支架表面结构;通过拉伸试验测定材料
【机 构】
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200127 上海市 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心转化医学研究所,胸心外科;200011 上海市 上海市组织工程重点实验室
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目的 探索静电纺丝技术制备的有序rGO/PLCL支架对hiPSC-CPC心肌分化的影响.方法 采用静电纺丝技术制备有序rGO/PLCL支架.使用扫描电镜观察支架表面结构;通过拉伸试验测定材料机械性能;利用XRD测定支架成分;通过电阻率测定评估支架导电性;种植hiPSC-CPC评估该材料对心肌分化、增殖、形态的影响;通过qPCR、RNA-seq探索rGO对hiPSC-CPC心肌分化基因水平的影响.结果 扫描电镜显示,支架材料表面纤维有序排列.拉伸试验显示,在干燥和湿润情况下支架都具有良好机械性能,rGO的加入增加了支架材料的应变能力.XRD验证了rGO/PLCL的成分组成.电阻率测定提示rGO的加入显著增加了支架的导电性.细胞试验显示支架对细胞具有引导作用,rGO的添加使更多的心肌细胞趋于成熟细胞形态,rGO的加入对细胞增殖无明显影响.qPCR结果提示rGO的加入上调了肌节成熟相关基因cTNT、MYH7/MYH6以及细胞间通信相关的连接蛋白CX43的表达.RNA-seq检测提示rGO主要通过下调与细胞外空间、细胞外区域、钙离子结合、细胞外基质组成和排列、细胞黏附等相关基因的表达来影响细胞分化.结论 有序rGO/PLCL支架具有有序排列的表面微结构、合适的力学性能以及良好的导电性和生物相容性,能够引导细胞排列,有利于改善hiPSC-CPC分化形成的心肌细胞的形态,以及促进肌节成熟相关基因的表达.
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