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目的构建重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—CSF)的高效表达质粒,将其表达产物用于分离纯化的研究。方法用人外周血单核细胞获得总RNA作为模板和修饰的5’端密码子的引物经RT—PCR反应扩增到人GM—CSF基因,插入温控表达载体pDH构建了突变的hGM—CSF表达质粒,并将在E.coli中获得表达的突变rhGM-CSF包含体8mol/L脲提取液进一步用离子交换色谱柱分离纯化。结果rhGM—CSF在大肠杆菌表达占茵体总蛋白量的22%,用弱阴离子交换色谱对rhGM—CSF的工程茵表达产物8mol/L