【摘 要】
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目的建立一种基于表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance technology,SPR)原理的生物传感器方法 ,实现11种常见致病菌的高通量检测。方法用表面自组装技术(self-asse
【机 构】
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深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心深圳市食品安全检测技术研发重点实验室,
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目的建立一种基于表面等离子共振技术(Surface Plasmon Resonance technology,SPR)原理的生物传感器方法 ,实现11种常见致病菌的高通量检测。方法用表面自组装技术(self-assembled monolayer,SAM)在金膜表面引入羧基,然后通过氨-羧基反应将5’端标记有氨基的探针固定在芯片表面,经多重PCR扩增出的产物变性、杂交、生物素-亲和素系统信号放大等步骤完成目的片段的检测。对所建立的多重PCR-SPR检测方法的灵敏性、特异性等技术指标进行评价。结果本研究建立的多重PCR-SPR检测方法具有良好的灵敏性,该芯片检测11种常见致病菌的灵敏性均达到103~104cfu/m L,能满足现有检测要求。通过对实验室保存的14株标准菌株和沙门氏菌等90份样品分离株进行检测,结果显示该检测方法具有较好的特异性,无交叉反应。结论 本研究建立的多重PCR-SPR检测系统具有良好的灵敏性和特异性,完全适用于11种致病菌的高通量检测。该检测方法检测时间短、检测成本低、减少了人为因素的影响,具有良好的应用前景。
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