【摘 要】
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目的：利用重叠PCR-酶切连接法人工合成风疹病毒E1基因的全长序列。方法：对风疹E1基因进行生物信息学分析,根据大肠杆菌密码子偏爱性对其密码子进行优化;设计多对寡核苷酸引物,
【机 构】
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暨南大学生命科学技术学院生殖免疫研究所
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目的：利用重叠PCR-酶切连接法人工合成风疹病毒E1基因的全长序列。方法：对风疹E1基因进行生物信息学分析,根据大肠杆菌密码子偏爱性对其密码子进行优化;设计多对寡核苷酸引物,以重叠PCR法分别合成该基因的3个片段,测序鉴定后以酶切连接法将各段拼接成全长为1 443 bp的RVrE1,将E1基因的全长序列克隆导入原核表达载体pET32a。结果：分别进行8轮、5轮和6轮的重叠PCR扩增,合成风疹基因3个片段;以酶切连接法将3个片段拼接成全长rE1基因并克隆入pET32a构建成载体pET32-RV rE1,PC
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