利用志贺毒素B亚基融合蛋白研究其胞内降解作用

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志贺毒素B亚基(StxB)能与哺乳动物细胞表面受体糖脂Gb3特异结合内吞进入细胞,经早期胞内体/循环胞内体到达高尔基体后,再逆向运输至内质网。目前研究尚不明确StxB在胞内运输时是否发生降解。本文利用基因工程原理在StxB的C端添加Myc标签,获得融合蛋白StxB—Myc,应用免疫荧光方法,研究StxB的C端是否发生水解。实验结果表明,融合蛋白StxB—Myc在从细胞膜经胞内体到达高尔基体的过程中不发生水解;进入高尔基体后,B亚基C端发生降解,降解后的小片段能逐渐进入溶酶体中发生水解,而此过程不影响降解后
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