【摘 要】
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目的建立一种高效液相色谱（HPLC）测定血清-巨噬细胞间胆固醇净流动的方法，用以分析与动脉粥样硬化危险因素的关系。方法培养小鼠巨噬细胞J774，用含5%个体血清的培养基进行孵育8 h，HPLC测定孵育前后细胞胆固醇，计算个体血清介导的细胞胆固醇净流动，建立血清-巨噬细胞间胆固醇净流动的测定方法。2010年10至12月征集75名北京医院健康志愿者，男38例、女37例，采集空腹静脉血，用所建方法测定胆
【机 构】
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目的建立一种高效液相色谱（HPLC）测定血清-巨噬细胞间胆固醇净流动的方法，用以分析与动脉粥样硬化危险因素的关系。
方法培养小鼠巨噬细胞J774，用含5%个体血清的培养基进行孵育8 h，HPLC测定孵育前后细胞胆固醇，计算个体血清介导的细胞胆固醇净流动，建立血清-巨噬细胞间胆固醇净流动的测定方法。2010年10至12月征集75名北京医院健康志愿者，男38例、女37例，采集空腹静脉血，用所建方法测定胆固醇净流动；Spearman相关分析胆固醇净流动与血脂、脂蛋白、超敏C反应蛋白（hsCRP）等动脉粥样硬化危险因素的关系。
结果发现个体血清孵育细胞时导致细胞胆固醇内流，细胞胆固醇随培养基中血清浓度和孵育时间的增加而增多。HPLC测定细胞胆固醇净流动的平均批内变异和总变异分别为0.81%~4.03%和4.25%~6.58%。75例健康志愿者胆固醇净流动均值为10.27μg/mg蛋白，标准差2.69μg/mg蛋白，中位数10.12μg/mg蛋白。胆固醇净流动与血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、hsCRP，载脂蛋白（Apo）CⅡ、ApoCⅢ、小而密低密度脂蛋白胆固醇（LDLb-C）、高密度脂蛋白（HDL）胆固醇摩尔酯化速率（MERHDL）（P<0.001），HDL胆固醇分数酯化速率FERHDL、Preβ-HDL（P<0.01）等呈显著正相关，但与HDL及其亚类胆固醇无相关性（P>0.05）。
结论本研究建立了血清-巨噬细胞间胆固醇净流动的细胞分析体系和HPLC准确测定净流动的方法，为进一步研究血清-巨噬细胞间胆固醇净流动、HDL功能评价和心血管病危险分析提供了方法学基础。（中华检验医学杂志,2013,36:151-155）
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