论文部分内容阅读
家兔人工授精是先进科学的配种方式，与传统的自然交配方式相比有以下优点：①可以节省种公兔的饲养成本。②可以防止品种退化，保持和不断提高兔群的品种质量。③可以充分利用优良种公兔的精液资源，而且繁殖的仔兔个体大、生长快、成活率高、出栏早，实行人工授精可提高兔场经济效益30%。④避免了种兔间的直接接触，可预防兔病的传播。人工授精主要有采精、精液品质检验、精液的浓缩或稀释、精液的保存和输精等几个关键工序。
一、采精
1. 种公兔的准备。种公兔在采精前1周和整个采精期间必须加强营养、增强光照和运动，每天在室外活动2个小时。一般经过1周的营养补充和诱导发情，公兔性活动已明显增强，精液生成旺盛。在采精的前两天让公兔与母兔自然交配2次，以便能采到最佳品质的精液。采精最好安排在家兔性欲最活跃的清晨或晚上凉爽时进行。第一次采精后隔1天采2次（清晨、晚上各1次），连续2周、休息1周，然后再重复上述过程。如果公兔已停止使用15天以上，在使用前都要有一个上述的调理过程。
2. 采精器的准备。①假阴道。外壳为直径30毫米、长80～85毫米的硬塑料管，内胎为人用避孕套。②集精杯。双层玻璃套瓶，外层为棕色保护瓶，内层为贮精瓶。③采精器的清洗与消毒。上述物品在使用前先用洗衣粉和1%高锰酸钾液刷洗干净，再用自来水、蒸馏水（或注射用水）依次冲洗，然后将塑料管和集精杯放在干燥箱内（160℃）或沸水内消毒20～30分钟。避孕套用蒸汽消毒15分钟。④假阴道的安装。先将消毒好的避孕套从管内穿过，一端翻套固定在外壳上，避孕套和塑料管之间加入40毫升左右45℃的热水，再将另一端翻套在外壳上，并用皮筋或胶圈固定，防止漏水或滑脱。集精杯两层之间加入37℃灭菌的温水，然后将其安装在假阴道的一端，固定。假阴道使用前，采精器整个内腔用配制的等渗精液稀释液冲洗1～2次。⑤采精的方法。将大小适宜、体质健壮、发情良好的母兔做台兔，将其阴部清洗消毒后，放到公兔笼内，先让公兔与台兔追逐片刻，以引起公兔的性欲。当公兔出现性冲动开始爬跨时，采精者左手抓住台兔的双耳及颈部皮肤，兔头向采精者方向固定，右手握住安装好的假阴道，以中指和无名指护住集精杯，从台兔腹部一侧将假阴道放到台兔两后腿之间，使假阴道口紧贴在阴门下部，并稍微用力托起台兔臂部。当公兔爬跨阴茎挺出时，采精者立即调整假阴道方向和位置，让公兔阴茎插入假阴道内。当公兔突然向前一挺、伴随一声尖叫倒在台兔一侧，说明公兔已射精完毕。这时，迅速把假阴道抽出，竖直，取下集精杯，采精完毕。
二、精液品质检验
1. 射精量。一般公兔射精量为0.5～2毫升，射精间隔时间长短对精液量有一定的影响。射精量越多，精子密度越高，活力越强，表示精液的品质越好。
2. 颜色和气味。正常家兔的精液呈淡乳白色，黏稠状，略带点腥味或无味。
3. 精子的活力。精子的活力是根据直线前进运动的精子占总精子数的百分比而判定，一般分为10个等级。如果全部精子几乎都呈直线前进运动则评为“1.0”级，90%的精子呈直线运动则评为“0.9”级，依次类推，直到“0.1”级。如果没有直线运动的精子，则为“0”级。显微镜观察方法：将0.5毫升精子在35℃温水中水浴5分钟，然后用吸管吸取少许精液滴于载玻片上，轻轻盖好盖玻片，用显微镜观察精子的活力和密度大小。优质精液呈直线运动的精子在70%以上，合格精液呈直线运动的精子在60%以上。
4. 精子的密度。测定精子密度的方法有估测法与计数法。①估测法。估测法是直接观察显微镜视野中精子的稠密程度。精子布满整个视野，像云雾一样为高度密集，这种精液每毫升含有精子3亿个以上；精子在视野间有明显的空隙，相当于2个精子的长度，可以看清各个精子的活动情况，这种精液为中等密集，每毫升有精子1亿～2亿个；精子在视野中零星分布，空隙很大，超过2个精子长度，这种精液稀薄，每毫升精子在1亿个以下。估测法一般在平时采精时使用。如果精子要进行精选保存，最好用计数法对精子密度进行评定。②计数法。计数法是检查精子数量最准确的方法。取精液稀释液1毫升于试管内，用毛细吸管吸取0.01毫升精液于稀释液内混匀，然后用滴棒将稀释好的精液滴入血细胞计数板的计数池内，计数5个方格内的精子数，乘以10万即得每毫升精子总数。精子总数在2亿个以上为优，1亿至2亿个为合格。在进行人工授精时，所采用的精液其射精量应在2毫升左右，精子活力在0.7以上，精子密度要为每毫升1.5亿个以上。
5. 精子的形态。精子的形态是关系到精子质量的另一项重要指标。正常的精子呈比例匀称的蝌蚪状。畸形精子有头部过大、头部过小、头部残缺、尾部残缺、头部断折、双头双尾、尾部卷曲断折等多种形态，未成熟的精子也属畸形精子。正常情况下，精子畸形率一般不超过15%。精子形态检查方法：用清洁吸管吸取原精液一小滴于干净玻片一端，另取一载玻片如制作血片一样制成均匀的精液抹片。等抹片自然干燥后，用龙胆紫染色3分钟，冲去染料后，用滤纸吸干水分放在400倍或600倍显微镜下观察，计数500个精子，数出畸形精子，畸形率=畸形数/500×100%
三、精液的稀释
在人工输精时，都要进行精液稀释。稀释目的是为了扩大精液的容积，增强精子的活力，延长精子的寿命，便于精子的运输与保存。常用的精液稀释液主要有以下3种：
1. 5%葡萄糖卵黄稀释液。将医院输液用的10%葡萄糖溶液用注射用水稀释成5%的浓度，用注射器抽取1～3毫升新鲜的卵黄加入到5%的葡萄糖注射液中，然后加入青、链霉素各10万单位，摇匀即可。
2. 11%蔗糖卵黄稀释液。取蔗糖11克加蒸馏水80毫升，待溶解后加水至100毫升，过滤，密封，高压灭菌20分钟，待温度降至25℃时，用注射器抽取1～3毫升新鲜卵黄加入到11%蔗糖溶液内，再加青、链霉素各10万单位，摇匀即可。
3. 蔗糖、奶粉、磷酸盐稀释液。取磷酸二氢钠0.41克、磷酸氢二钠1.69克，溶于50毫升蒸馏水中。取蔗糖5.5克、牛奶2.5克放入磷酸盐溶液中，再加蒸馏水至100毫升。过滤后密封高压消毒20分钟，冷却后加入青、链霉素各10万单位，摇匀即可。
上述稀释液可在4℃下保存14天左右。稀释液最好现用现配，以免时间过久变质腐败。稀释液使用前都要在温水中预热到35℃。精液稀释时，取品质优良的精液1毫升和精液稀释液3～5毫升混匀即可。
四、输精
家兔人工授精应着重掌握什么时候输精和怎样输精两个要点。家兔属于交配刺激排卵型动物，雌兔在发情期间，只有经过公兔爬跨交配刺激后，其卵巢中的卵才会在10～12小时排出。若不进行交配刺激，卵巢中的卵便会在体内自行萎缩，退化吸收。因此，在给发情母兔输精前，必须先用结扎的公兔进行爬跨交配刺激或注射性激素促其卵巢排卵。具体操作方法是：当发情母兔正值旺情期时，将其放入已结扎的公兔的笼内，让公兔与其自然交配后取出，5～6个小时后进行输精。也可肌内注射促排3号，6个小时后输精。为了保证输精成功，可在第二天再重复输精1次。
1. 输精器的准备。规格为5毫升的注射器和150毫米长的女用尿管经消毒处理后，放在无菌盒中待用。输精前用注射器吸取2～3毫升精液稀释液，将输精管（导尿管）冲洗1～2次，然后将待输的精液吸入注射器内，套上输精管。为了防止精液在输精管中滞留，注射器在抽取精液前可先吸入1毫升的空气，输精时连同空气一同推入阴道内，这样输精管内的精液就可全部推入阴道。
2. 输精操作。先将母兔保定好，外阴用生理盐水冲洗干净。接着把母兔臀部抬高，输精者左手分开阴唇，右手持输精管缓缓插入阴道。当插入7～8厘米深时（家兔阴道长度一般在8～12厘米）将胶管来回抽动数次，刺激母兔，然后将精液注入。输精完毕，在母兔臀部拍几下，让母兔阴道收缩，这样可防止精液倒流。输精后要让母兔安静休息。
3. 注意事项。①在整个输精过程中，一定要严格消毒，无菌操作，防止感染。②在整个输精过程中，手法要轻，操作要干净利落。要保证输精器具内没有对精子有害的药物及液体，保证精液温度和输入过程尽量模仿自然交配过程。③输精的部位一定要准确无误，避免将输精管插入尿道口中。母兔的膀胱在阴道内5～6厘米深处的下方，在插输精管时要沿阴道壁的背侧面插入6～7厘米深，越过尿道口以后再往里插1～2厘米，如没有尿液流出证明已插入子宫，这时再输入精液。④输精完毕后，器具要及时清洗、消毒，防止液体在其内粘结，影响下次使用。⑤输精后要及时进行登记、备案。
五、精液的保存
精液经稀释处理后，可以存放在一恒定温度中。如现采现用，精液保存在30℃左右的环境中即可。若存放4～8小时，可在15～20℃的室温环境中保存。需长时间存放的，则须先缓慢降温，再放入冰箱（或冷藏杯等）内0～5℃保存，使用时再缓慢升温。据试验，只要保存得当，精子的存活时间可达200小时以上。
作者简介：渔讯，养兔技术指导专家，出版专著《新法养兔》（金盾出版社）。联系地址：北京市石景山碣石坪小区11楼2单元501B室，邮编：100043。
一、采精
1. 种公兔的准备。种公兔在采精前1周和整个采精期间必须加强营养、增强光照和运动，每天在室外活动2个小时。一般经过1周的营养补充和诱导发情，公兔性活动已明显增强，精液生成旺盛。在采精的前两天让公兔与母兔自然交配2次，以便能采到最佳品质的精液。采精最好安排在家兔性欲最活跃的清晨或晚上凉爽时进行。第一次采精后隔1天采2次（清晨、晚上各1次），连续2周、休息1周，然后再重复上述过程。如果公兔已停止使用15天以上，在使用前都要有一个上述的调理过程。
2. 采精器的准备。①假阴道。外壳为直径30毫米、长80～85毫米的硬塑料管，内胎为人用避孕套。②集精杯。双层玻璃套瓶，外层为棕色保护瓶，内层为贮精瓶。③采精器的清洗与消毒。上述物品在使用前先用洗衣粉和1%高锰酸钾液刷洗干净，再用自来水、蒸馏水（或注射用水）依次冲洗，然后将塑料管和集精杯放在干燥箱内（160℃）或沸水内消毒20～30分钟。避孕套用蒸汽消毒15分钟。④假阴道的安装。先将消毒好的避孕套从管内穿过，一端翻套固定在外壳上，避孕套和塑料管之间加入40毫升左右45℃的热水，再将另一端翻套在外壳上，并用皮筋或胶圈固定，防止漏水或滑脱。集精杯两层之间加入37℃灭菌的温水，然后将其安装在假阴道的一端，固定。假阴道使用前，采精器整个内腔用配制的等渗精液稀释液冲洗1～2次。⑤采精的方法。将大小适宜、体质健壮、发情良好的母兔做台兔，将其阴部清洗消毒后，放到公兔笼内，先让公兔与台兔追逐片刻，以引起公兔的性欲。当公兔出现性冲动开始爬跨时，采精者左手抓住台兔的双耳及颈部皮肤，兔头向采精者方向固定，右手握住安装好的假阴道，以中指和无名指护住集精杯，从台兔腹部一侧将假阴道放到台兔两后腿之间，使假阴道口紧贴在阴门下部，并稍微用力托起台兔臂部。当公兔爬跨阴茎挺出时，采精者立即调整假阴道方向和位置，让公兔阴茎插入假阴道内。当公兔突然向前一挺、伴随一声尖叫倒在台兔一侧，说明公兔已射精完毕。这时，迅速把假阴道抽出，竖直，取下集精杯，采精完毕。
二、精液品质检验
1. 射精量。一般公兔射精量为0.5～2毫升，射精间隔时间长短对精液量有一定的影响。射精量越多，精子密度越高，活力越强，表示精液的品质越好。
2. 颜色和气味。正常家兔的精液呈淡乳白色，黏稠状，略带点腥味或无味。
3. 精子的活力。精子的活力是根据直线前进运动的精子占总精子数的百分比而判定，一般分为10个等级。如果全部精子几乎都呈直线前进运动则评为“1.0”级，90%的精子呈直线运动则评为“0.9”级，依次类推，直到“0.1”级。如果没有直线运动的精子，则为“0”级。显微镜观察方法：将0.5毫升精子在35℃温水中水浴5分钟，然后用吸管吸取少许精液滴于载玻片上，轻轻盖好盖玻片，用显微镜观察精子的活力和密度大小。优质精液呈直线运动的精子在70%以上，合格精液呈直线运动的精子在60%以上。
4. 精子的密度。测定精子密度的方法有估测法与计数法。①估测法。估测法是直接观察显微镜视野中精子的稠密程度。精子布满整个视野，像云雾一样为高度密集，这种精液每毫升含有精子3亿个以上；精子在视野间有明显的空隙，相当于2个精子的长度，可以看清各个精子的活动情况，这种精液为中等密集，每毫升有精子1亿～2亿个；精子在视野中零星分布，空隙很大，超过2个精子长度，这种精液稀薄，每毫升精子在1亿个以下。估测法一般在平时采精时使用。如果精子要进行精选保存，最好用计数法对精子密度进行评定。②计数法。计数法是检查精子数量最准确的方法。取精液稀释液1毫升于试管内，用毛细吸管吸取0.01毫升精液于稀释液内混匀，然后用滴棒将稀释好的精液滴入血细胞计数板的计数池内，计数5个方格内的精子数，乘以10万即得每毫升精子总数。精子总数在2亿个以上为优，1亿至2亿个为合格。在进行人工授精时，所采用的精液其射精量应在2毫升左右，精子活力在0.7以上，精子密度要为每毫升1.5亿个以上。
5. 精子的形态。精子的形态是关系到精子质量的另一项重要指标。正常的精子呈比例匀称的蝌蚪状。畸形精子有头部过大、头部过小、头部残缺、尾部残缺、头部断折、双头双尾、尾部卷曲断折等多种形态，未成熟的精子也属畸形精子。正常情况下，精子畸形率一般不超过15%。精子形态检查方法：用清洁吸管吸取原精液一小滴于干净玻片一端，另取一载玻片如制作血片一样制成均匀的精液抹片。等抹片自然干燥后，用龙胆紫染色3分钟，冲去染料后，用滤纸吸干水分放在400倍或600倍显微镜下观察，计数500个精子，数出畸形精子，畸形率=畸形数/500×100%
三、精液的稀释
在人工输精时，都要进行精液稀释。稀释目的是为了扩大精液的容积，增强精子的活力，延长精子的寿命，便于精子的运输与保存。常用的精液稀释液主要有以下3种：
1. 5%葡萄糖卵黄稀释液。将医院输液用的10%葡萄糖溶液用注射用水稀释成5%的浓度，用注射器抽取1～3毫升新鲜的卵黄加入到5%的葡萄糖注射液中，然后加入青、链霉素各10万单位，摇匀即可。
2. 11%蔗糖卵黄稀释液。取蔗糖11克加蒸馏水80毫升，待溶解后加水至100毫升，过滤，密封，高压灭菌20分钟，待温度降至25℃时，用注射器抽取1～3毫升新鲜卵黄加入到11%蔗糖溶液内，再加青、链霉素各10万单位，摇匀即可。
3. 蔗糖、奶粉、磷酸盐稀释液。取磷酸二氢钠0.41克、磷酸氢二钠1.69克，溶于50毫升蒸馏水中。取蔗糖5.5克、牛奶2.5克放入磷酸盐溶液中，再加蒸馏水至100毫升。过滤后密封高压消毒20分钟，冷却后加入青、链霉素各10万单位，摇匀即可。
上述稀释液可在4℃下保存14天左右。稀释液最好现用现配，以免时间过久变质腐败。稀释液使用前都要在温水中预热到35℃。精液稀释时，取品质优良的精液1毫升和精液稀释液3～5毫升混匀即可。
四、输精
家兔人工授精应着重掌握什么时候输精和怎样输精两个要点。家兔属于交配刺激排卵型动物，雌兔在发情期间，只有经过公兔爬跨交配刺激后，其卵巢中的卵才会在10～12小时排出。若不进行交配刺激，卵巢中的卵便会在体内自行萎缩，退化吸收。因此，在给发情母兔输精前，必须先用结扎的公兔进行爬跨交配刺激或注射性激素促其卵巢排卵。具体操作方法是：当发情母兔正值旺情期时，将其放入已结扎的公兔的笼内，让公兔与其自然交配后取出，5～6个小时后进行输精。也可肌内注射促排3号，6个小时后输精。为了保证输精成功，可在第二天再重复输精1次。
1. 输精器的准备。规格为5毫升的注射器和150毫米长的女用尿管经消毒处理后，放在无菌盒中待用。输精前用注射器吸取2～3毫升精液稀释液，将输精管（导尿管）冲洗1～2次，然后将待输的精液吸入注射器内，套上输精管。为了防止精液在输精管中滞留，注射器在抽取精液前可先吸入1毫升的空气，输精时连同空气一同推入阴道内，这样输精管内的精液就可全部推入阴道。
2. 输精操作。先将母兔保定好，外阴用生理盐水冲洗干净。接着把母兔臀部抬高，输精者左手分开阴唇，右手持输精管缓缓插入阴道。当插入7～8厘米深时（家兔阴道长度一般在8～12厘米）将胶管来回抽动数次，刺激母兔，然后将精液注入。输精完毕，在母兔臀部拍几下，让母兔阴道收缩，这样可防止精液倒流。输精后要让母兔安静休息。
3. 注意事项。①在整个输精过程中，一定要严格消毒，无菌操作，防止感染。②在整个输精过程中，手法要轻，操作要干净利落。要保证输精器具内没有对精子有害的药物及液体，保证精液温度和输入过程尽量模仿自然交配过程。③输精的部位一定要准确无误，避免将输精管插入尿道口中。母兔的膀胱在阴道内5～6厘米深处的下方，在插输精管时要沿阴道壁的背侧面插入6～7厘米深，越过尿道口以后再往里插1～2厘米，如没有尿液流出证明已插入子宫，这时再输入精液。④输精完毕后，器具要及时清洗、消毒，防止液体在其内粘结，影响下次使用。⑤输精后要及时进行登记、备案。
五、精液的保存
精液经稀释处理后，可以存放在一恒定温度中。如现采现用，精液保存在30℃左右的环境中即可。若存放4～8小时，可在15～20℃的室温环境中保存。需长时间存放的，则须先缓慢降温，再放入冰箱（或冷藏杯等）内0～5℃保存，使用时再缓慢升温。据试验，只要保存得当，精子的存活时间可达200小时以上。
作者简介：渔讯，养兔技术指导专家，出版专著《新法养兔》（金盾出版社）。联系地址：北京市石景山碣石坪小区11楼2单元501B室，邮编：100043。