【摘 要】
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为建立一种基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）的快速检测方法，根据其ORF6基因保守序列设计了3对特异性引物，通过引物筛选及条件优化，建立了基因2型PRRSV的反转录-重组酶介导等温扩增（reverse transcription recombinase-aided isothermal
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（31902303）； 江苏省高等学校大学生创新创业训练计划项目（202110324112H）；
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为建立一种基因2型猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）的快速检测方法，根据其ORF6基因保守序列设计了3对特异性引物，通过引物筛选及条件优化，建立了基因2型PRRSV的反转录-重组酶介导等温扩增（reverse transcription recombinase-aided isothermal amplification,RT-RAA）快速检测方法。结果显示：该方法在40℃恒温孵育25 min即可完成靶序列扩增；特异性强，和猪伪狂犬病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒均无交叉反应；灵敏度高，最低检出限为2×10~0 TCID50/μL，是常规RT-PCR方法的10倍；应用该方法对39份疑似PRRSV感染的临床样品进行检测，检出阳性样品25份，和实验室前期建立的荧光定量RT-PCR方法检测结果一致。以上结果说明，本研究建立的RT-RAA检测方法简便快速、特异性强、灵敏度高、临床适用性好，为PRRSV感染的快速诊断提供了新的技术手段。
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