携带Foxp3基因慢病毒载体的构建

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【摘要】

：

目的构建携带叉头样转录因子p3（Foxp3）基因的重组慢病毒载体PWPXL-MOD-Foxp3,并包装成慢病毒,为体外获得CD4＋CD2＋5调节性T细胞（CD4＋CD2＋5 Tregs）奠定基础。方法采用双酶切法构建慢病

【作者】

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陈春李永翔罗庆礼

【机构】

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安徽医科大学第一附属医院,安徽医科大学教育部省部共建重要遗传病基因资源利用重点实验室

【出处】

：

山东医药

【发表日期】

：

2011年26期

【关键词】

：

叉头样转录因子p3基因慢病毒 CD4+CD2+5调节性T细胞基因治疗

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目的构建携带叉头样转录因子p3（Foxp3）基因的重组慢病毒载体PWPXL-MOD-Foxp3,并包装成慢病毒,为体外获得CD4＋CD2＋5调节性T细胞（CD4＋CD2＋5 Tregs）奠定基础。方法采用双酶切法构建慢病毒表达载体PWPXL-MOD-Foxp3,用磷酸钙沉淀法将包装慢病毒所需的四质粒系统共转染人胚肾细胞293T,慢病毒系统转染48h后收集病毒上清液,纯化、浓缩后采用流式细胞术测定慢病毒滴度。结果重组的慢病毒载体滴度为3.3×108IU/ml。结论成功构建了含有Foxp3基因的高滴

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