观察微小RNA-132(miR-132)转染人胰腺癌细胞株SW1990后对细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其作用机制。
方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测28例胰腺癌及匹配的癌旁正常胰腺组织miR-132的表达。采用脂质体将miR-132转染SW1990细胞,以未转染及转染错义miR-132的细胞分别作为空白对照和阴性对照。应用CCK-8法、DAPI染色法检测细胞的增殖及凋亡;将转染细胞种植于裸鼠皮下成瘤,应用TUNEL法检测种植瘤细胞凋亡;免疫组化法检测转染细胞的mucin-4、HER-2、p-FAK蛋白表达及种植瘤组织mucin-4、Ki-67蛋白表达。
结果28例胰腺癌及癌旁正常胰腺组织miR-132的相对表达量分别为0.46±0.11和1.24±0.36,差异有统计学意义(P<0.05)。转染细胞的miR-132表达量为2.95±0.46,显著高于阴性对照组的0.84±0.17(P<0.05);转染组细胞培养48、72、96 h时的存活率分别为阴性对照组56.5%、44.7%、37.4%(P值均<0.05);细胞凋亡率为41.6%,显著高于阴性对照组的5.7%(P<0.05);转染细胞mucin-4、HER-2、p-FAK蛋白的表达较阴性对照组显著下调(0.76±0.14比2.94±0.42,0.34±0.04比1.75±0.33,0.27±0.03比2.74±0.24,P值均<0.01)。与阴性对照组比较,转染组裸鼠皮下移植瘤生长明显被抑制[(0.23±0.05)g比(0.59±0.13)g,P<0.05],瘤内肿瘤细胞凋亡明显增加[(21.7±4.7)%比(5.2±0.7)%,P<0.05],mucin-4和Ki-67蛋白表达显著下调(64.35±7.16比281.34±36.62,30.75±4.61比148.05±21.34,P值均<0.01)。而阴性对照组与空白对照组间的差异均无统计学意义。
结论转染miR-132对胰腺癌SW1990细胞有显著的增殖抑制和凋亡诱导作用,其机制可能与下调mucin-4、HER-2、p-FAK等蛋白的表达有关。