纳豆芽孢杆菌Bna05菌株产抗霉脂肽的鉴定

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【目的】分析枯草芽孢杆菌纳豆菌亚种Bna05菌株代谢产物中脂肽类物质的存在情况,并探讨它们在抗霉功能中所发挥的作用。【方法】利用特异性引物对Bna05菌株进行脂肽合成酶类基因片段扩增、测序和BLAST比对分析;通过平板抑菌圈区域取样法获得Bna05菌株的高抗霉活性代谢产物,对该产物进行反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离;用琼脂微稀释法测定分离物的抗霉活性,并对活性分离物进行质谱鉴定。【结果】Bna05菌株含有sfp和srf AA基因,未检测到itu C、itu D、fen D、fen ACE、bym B、bym C基因;RP-HPLC分离得到3组抗霉活性物质F2、F3和F4,F2中未检测到脂肽类物质,从F3和F4中分别鉴定出两类Surfactin同系物:V7-surfactin和I/L7-surfactin。两类Surfactin分别与F2组合使用时,均表现出抗霉协同作用;此外,与Surfactin单独使用相比,两类Surfactin混合物与F2组合后的协同抗霉活性得到进一步增强。【结论】Bna05菌株所产脂肽类物质主要是V7-surfactin和I/L7-surfactin,Surfactin与Bna05菌株所产其它活性物质之间存在抗霉协同作用,而V7-surfactin和I/L7-surfactin的同时存在,对于增强这种协同抗霉作用是有利的。
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