错配PCR限制片段长度多态性分析:检测HBV前C区A_(83)点突变

来源 :第一军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:daiguangying
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为建立一种简易的检测HBV前C区A83点突变的方法,设计了一种针对A83变异株的错配引物,通过PCR,可在A83变异株的扩增产物中引入一个BSU36I限制酶位点,将扩增产物(102bp)用该酶消化,含变异者显示82bp的酶切片段,以此判定的变异与测序结果一致。用本法检测了慢性乙型肝炎12例和随访HBe血清转换者5例,结果表明前C区A83变异与病变发展一致。 In order to establish a simple method to detect A83 point mutation in pre-HBV C region, a mismatch primer designed for A83 mutant was designed. By PCR, a BSU36I restriction enzyme site was introduced into the amplified product of A83 mutant The amplified product (102bp) was digested with this enzyme. The mutants showed a 82bp digested fragment, which was consistent with the sequencing results. Using this method to detect 12 cases of chronic hepatitis B and follow-up HBe seroconversion in 5 cases, the results show that the pre-C area A83 mutation consistent with the development of lesions.
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