鸡细胞色素P450 1A5的原核表达与活性重组

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旨在对鸡细胞色素P4501A5(CYPlA5)蛋白进行体外功能研究,采用大肠杆菌系统进行CYPIA5的异源表达。以鸡的cDNA为模板,扩增出CYPIA5基因,将该基因的N端编码区进行修饰,并连接到pCW载体中构建His-CYPIA5,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达。经CO-差示光谱检测,所获得的His-CYPlA5具有典型的P450吸收峰。该蛋白与细胞色素P450还原酶(CPR)进行体外重组,构成的重组酶系表现出乙氧基试卤灵-O-脱乙基酶活性。结果表明,所采用的表达策略可以成功产生出具有催化活性的鸡细胞色
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