人兽共患病病毒基因芯片检测敏感性的测定

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目的测定人兽共患病病毒基因芯片检测的敏感性,为建立高通量的人兽共患病病毒检测基因芯片提供依据。方法以黄病毒属的日本脑炎病毒(JBEV)作为检测敏感性的模型,以随机PCR扩增法扩增病毒基因组,然后将扩增产物标记荧光染料后与基因芯片进行杂交,以两种方式测定芯片的敏感性,即最低检出核酸量和最低检出病毒TCID50量。最后,与特异PCR敏感性比较,评估本芯片的检测敏感性。结果人兽共患病病毒基因芯片至少可以检测出300ng的随机PCR产物核酸量。对病毒的检测敏感性可以达到10倍稀释的TCID50病毒量(即每200μ
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