sCR1在原核中表达、纯化、复性及活性鉴定

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目的采用原核表达载体pET28a在E.coilBL21(DE3)中获得高表达、高活性的重组人sCRI融合蛋白。方法从人外周血中提取总RNA,应用RT-PCR获得人sCRI全长cDNA,将其克隆入原核表达载体pET28a中,构建含人sCR1的重组质粒(pET28a—sCR1),经测序鉴定正确,转化入E.coliBL21(DE3)中,经1PTG诱导,表达产物经SDS—PAGE分析和Western blot鉴定,通过Ni2+-NTA agarose亲和层析纯化后进行复性及生物学活性鉴定。结果获得原核表达载体pE
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