【摘 要】
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目的:探讨银杏内酯B(GB)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和成骨分化的影响及可能机制.方法:不同浓度(10,20,40 mg·L-1)的GB作用hBMSCs细胞后,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测
【机 构】
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枣庄矿业集团枣庄医院创伤骨科 山东枣庄277100;枣庄矿业集团枣庄医院麻醉科;枣庄市立医院脊柱外科
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目的:探讨银杏内酯B(GB)对人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)增殖和成骨分化的影响及可能机制.方法:不同浓度(10,20,40 mg·L-1)的GB作用hBMSCs细胞后,四甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖,实时定量聚合酶链式反应PCR(RT-qPCR)检测细胞中配对盒基因6(PAX6)的mRNA表达,蛋白印迹(Western Blot)法检测细胞中PAX6蛋白表达.不同浓度(10,20,40 mg·L-1)的GB作用成骨诱导的hBMSCs细胞14 d后,RT-qPCR检测细胞中碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(OCN)和骨桥蛋白(OPN)的mRNA表达,Western Blot法检测细胞中AKP、OCN和OPN的蛋白表达.转染PAX6过表达载体至hBM-SCs,上述相同方法观察过表达PAX6对hBMSCs增殖及AKP、OCN和OPN的mRNA和蛋白表达的影响.结果:GB作用hBM-SCs后,细胞活性显著升高(P<0.05),PAX6的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).GB作用成骨诱导的hBMSCs细胞14 d后,细胞中AKP、OCN和OPN的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).过表达PAX6后,hBMSCs活性显著升高(P<0.05),成骨诱导的细胞中AKP、OCN和OPN的mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05).抑制PAX6表达且同时使用GB作用时(GB+si-PAX6),hBMSCs活性及成骨诱导后细胞中AKP、OCN和OPN的mRNA和蛋白表达水平均显著低于只使用GB作用(GB+si-NC)(P<0.05).结论:GB可促进hBMSCs增殖和成骨分化,其作用机制与上调PAX6表达有关.
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