重组SARS冠状病毒棘突蛋白S1区基因片段的克隆、表达及免疫原性研究

来源 :中华实验和临床病毒学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ssssssfs
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 构建SARS冠状病毒(SARS-CoV)棘突(spike)蛋白(S蛋白)S1区基因(40~2001 bp)分段表达载体,并研究其免疫原性.方法利用PCR技术扩增S1区基因,将其定向插入pQE-30质粒,在pQE-30质粒上将S1切成3段(40~751、746~1344、746~2001 bp),均插入pQE-30质粒,构建质粒在大肠埃希菌M15中表达,表达产物经亲和层析纯化及Western Blot和ELISA鉴定.结果构建的3种重组质粒(pQE-30/S1a、pQE-30/S1b、pQE-30/S1c)均高效表达,重组蛋白相对分子质量分别为26 700、22 500和46 000,表达量分别占菌体总蛋白质的35%、35%和30%.3种重组蛋白经Ni亲和层析树脂得到成功纯化.经Western Blot及ELISA证实,重组蛋白片段S1c(746~2001bp)可以被SARS患者血清所识别.结论成功构建了SARS-CoV S蛋白S1区基因分段表达载体,重组蛋白S1c具有较强的免疫原性,它的获得为下一步疫苗的研制奠定了基础。

其他文献
已有许多国家确认艾滋病毒/艾滋病(HIV/AIDS)在男男性接触者(men who have sex with men,MSM)中的流行.在不同程度上,男男之间的HIV性传播是AIDS流行的重要途径之一.在大多数发达国家,这个途径一直是HIV传播的主要方式之一。
期刊
期刊
《中华眼底病杂志》由中国科学技术协会主管,中华医学会主办,四川大学华西医院承办。为中文核心期刊、中国科技论文统计源期刊,并被美国《化学文摘》、日本科学技术情报中心(JICST)数据库、WHO西太区医学索引(WPRIM)以及中国科学引文数据库等多家国内外数据库收录。
期刊
期刊
鸟苷酸结合蛋白偶联受体(GPCRs)是一类膜受体超家族,被视为最好的药物靶点.在糖尿病视网膜病变(DR)进程中有大量不同亚型GPCRs参与.其中,视紫红质类和卷曲蛋白(Frizzled)受体广受关注,研究方向主要为视网膜炎症反应、新生血管生成、神经元和神经胶质细胞损伤等.血管紧张素Ⅱ受体是最为熟知的视紫红质类受体亚家族.应用血管紧张素Ⅱ受体1拮抗剂可显著降低1型糖尿病患者发生DR的可能性,但无法减
目的 制备人干扰素k(hIFN—K)并初步研究其生物学活性。方法克隆hIFN—k的cDNA并根据大肠埃希菌的密码子偏好性人工合成了hIFN—k基因,在大肠埃希菌DH5α中高效表达、纯化后测定了rhIFN—k的多种生物学活性,包括抗病毒活性、抗细胞增殖活性、种属特异性以及NK细胞调节活性。结果成功地获得了高纯度的rhIFN—k,纯度存90%以上。利用WISH—VSV系统检测rhIFN—k的抗病毒活力
期刊
人乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)有严格的宿主特异性,至今除黑猩猩外,尚无HBV感染的动物模型,因此,制约了对HBV感染、复制和致病机理的研究及新药的开发。
期刊
肢体动脉硬化性闭塞症(Arteriosclerosis Obliterans, ASO)是一种常见的血管外科疾病,为全身性动脉粥样硬化(Artheriosclerosis, AS)主要并发症.死亡率及致残率也较高.自1998年底至2001年我们进行了HCMV感染与ASO相关性的研究并对108例ASO病例进行临床治疗观察.现将结果报道如下。
期刊
视网膜血管性疾病是以视网膜血管改变为原发性、核心性改变的一大类疾病.视网膜血管具有系统从属性、器官特异性和功能辅助性等三大基本特性,这些基本特性是各类视网膜血管性疾病的共同基础.深入认识视网膜血管的特性,将为我们正确认识和妥善处理视网膜血管性疾病提供帮助.基于视网膜血管的系统从属性,在视网膜血管性疾病诊断治疗过程中,需要注意疾病的病因探究和全身系统用药治疗时药物对全身系统的影响;根据视网膜血管的器
艾滋病,即获得性免疫缺陷综合征(AIDS)是由人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的一种免疫缺陷性疾病.世界范围内AIDS预防控制工作的首要任务在于识别出早期感染的人群(新发感染人群),进而估计HIV的发病率,掌握HIV感染的变化趋势,同时对早期感染人群进行干预和有效控制,以遏制HIV的蔓延趋势。
期刊