【摘 要】
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目的 采用激光共聚焦显微镜,观察荧光标记的反义寡核苷酸探针在细胞的摄取和细胞内分布.并评价阳离子脂质体载体对提高细胞摄取的作用.方法 合成针对人端粒酶逆转录酶基因(hT
【机 构】
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中国人民解放军总医院核医学科 北京市,100853
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目的 采用激光共聚焦显微镜,观察荧光标记的反义寡核苷酸探针在细胞的摄取和细胞内分布.并评价阳离子脂质体载体对提高细胞摄取的作用.方法 合成针对人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)第1723-1741密码子的18个碱基的反义寡核苷酸探针,在3末端连接荧光素-5-异硫氰酸盐(FITC).转hTERT的胎儿神经前体细胞hNPCs-G3作为实验细胞.阳离子脂质体作为反义探针载体.激光扫描共聚焦显微镜观察细胞荧光分布并测定荧光强度.结果 无脂质体介导的对照组细胞荧光强度很低,荧光主要分布在细胞膜,细胞浆和细胞核荧光强度低于细胞膜.脂质体介导的实验组细胞荧光强度显著增加,细胞核荧光强度显著高于细胞膜,两者的荧光强度差异有显著意义(P＜0.01).结论 无载体的反义探针细胞摄取率较低,细胞膜探针结合较多.脂质体载体可显著提高细胞对探针的摄取,且大部分探针进入细胞核.激光扫描共聚焦显微镜可以清晰显示细胞对探针的摄取及细胞分布,是一种直观有效的研究工具.
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