【摘 要】
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目的:探讨外泌体miR-21参与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)促进膀胱癌细胞侵袭转移的作用及机制。方法:利用组织块贴壁法分别从膀胱癌和癌旁组织分离
【机 构】
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南京市高淳人民医院泌尿外科; 南京中医药大学附属医院泌尿外科;
【基金项目】
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江苏大学临床医学科技发展基金项目资助(JLY20180227)
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目的:探讨外泌体miR-21参与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)促进膀胱癌细胞侵袭转移的作用及机制。方法:利用组织块贴壁法分别从膀胱癌和癌旁组织分离CAF和正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NF),利用荧光实时定量PCR检测膀胱癌组织,CAF、NF和相应外泌体,以及外泌体共孵育的膀胱癌T24细胞中的miR-21的相对表达。通过Transwell侵袭迁移实验检测CAF、CAF分泌的外泌体及miR-21对膀胱癌细胞侵袭迁移能力的影响。蛋白质印迹及荧光素酶实验明确miR-21的靶基因。结果:相较于癌旁组织,miR-21在膀胱癌组织,尤其是分期较晚的浸润性膀胱癌组织中高表达。CAF分泌的外泌体中miR-21的表达水平明显高于NF分泌的外泌体。与CAF、CAF分泌的外泌体孵育及转染miR-21,可显著增强T24细胞侵袭迁移的能力。进一步荧光素酶实验证实miR-21可靶向抑制同源性磷酸酶张力蛋白(PTEN)的表达。结论:CAF可释放高表达miR-21的外泌体,被膀胱癌细胞摄取后,通过靶向抑制PTEN,促进膀胱癌细胞侵袭转移的发生。
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