鸡γ-干扰素实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

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为建立一种检测鸡γ干扰素的实时荧光定量RT-PCR方法,采用RT-PCR方法从ConA诱导活化的鸡脾淋巴细胞的总RNA中扩增得到鸡γ干扰素(ChIFN-γ)和鸡的28 S rRNA(Ch28 S)基因,将其分别克隆至体外转录载体后经体外转录获得了ChIFN-γ和Ch28 S的RNA,采用各自的特异性引物及Taqman探针,以Ch28 S RNA作为内参进行一步法实时荧光定量RT-PCR,检测ChIFN-γ.结果表明:ChIFN-γ和内参Ch28 S的Ct值与标准品稀释梯度在1×102~1
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