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为了能够快捷地分离纯化出单一的抗菌肽,实验采用不同pH值（离子交换流动相pH3.0、4.0、5.0;反相液相层析流动相pH 2.0、4.5、7.0）缓冲液,不同色谱柱（离子交换和凝胶过滤层析柱分别与反相液相层析柱）联用对日本鳗鲡肝脏抗菌肽分离纯化效果进行了比较,并分析了琼脂板扩散法和微孔液体培养法检测抗菌活性的优缺点。结果显示：pH 4.0缓冲液为最佳离子交换流动相,蛋白提取率为16.43%,得到2个洗脱峰;反相液相层析3种pH缓冲液分离效果均不理想,凝胶过滤层析柱与反相液相层析柱联用能明显改善日本鳗鲡肝