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目的
检测分析核苷(酸)类似物(Nucleoside analogues, NAs)治疗后血清HBV DNA阴转的慢乙肝(Chronic hepatitis B, CHB)患者外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell, PBMC)中HBX基因,研究其临床意义。
方法对60例经抗病毒治疗后血清HBV DNA阴转的慢乙肝患者,其中有部分病情进展为乙肝后肝硬化(HBV-related liver cirrhosis)及肝细胞性肝癌(Hepatocellular carcinoma, HCC),采用实时荧光定量PCR检测其PBMC中HBX基因,并分析其序列特点及临床意义。
结果60例患者中PBMC样品检测出HBX基因片段的有37例,检出率61.67%(37/60);三组人群中,HCC、乙肝后肝硬化患者PBMC中HBX基因检出率明显高于CHB患者(P=0.000, P=0.010);通过直接测序法,在2例HCC患者及1例CHB患者中,检测到HBX蛋白突变体蛋白HBX△120、HBX△129、HBX△131截短体;发现A389T/G391A、T380C两个热点突变,且HCC患者中A389T/G391A突变发生率明显高于CHB患者(P=0.021);对于HBeAg(-)的肝硬化、HCC患者,T380C突变发生率高于HBeAg(+)患者(P=0.035)。
结论经NAs治疗后血清HBV DNA阴转的患者中,肝硬化、HCC患者的PBMC有更高的HBX检出率;HCC患者A389T/G391A双突变发生率高于CHB患者;HBeAg(-)的肝硬化、HCC患者T380C突变发生率高于HBeAg(+)患者。