Tet-on调控TAp63γ基因表达EC9706细胞系的建立及对细胞增殖的影响

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目的:利用Tet—on基因表达调控系统建立由强力霉素(Dox)诱导TAp63γ基因表达的EC9706细胞系,为进一步研究TAp63γ基因的功能奠定基础。方法:将调控质粒pTet—on转入EC9706细胞,经G418筛选后的细胞再次转染反应质粒pTRE—TAp63γ-HA,再用潮霉素筛选出阳性细胞克隆,RT—PCR法选择对Dox敏感的细胞克隆。最后用不同浓度Dox诱导,Western blot法确定Dox的最佳诱导浓度。采用此浓度的Dox分别诱导EC9706、EC9706/Tet/pTRE、EC9706/T
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