pGenesil-2.1- iASPP-shRNA质粒的构建及转染

来源 :山东医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：dawulitao

【摘要】

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目的构建针对iASPP基因的短发卡RNA干扰（iASPP-shRNA）质粒，并转染胃癌细胞AGS（p53野生型）。方法以iASPP为靶基因设计两条带有短发卡结构的寡核苷酸序列，连接到pGenesil-2．1载体，转化

【作者】

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饶敏李莉华郭子健梁环宇王晓艳过建工戴赛民

【机构】

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苏州大学附属第四人民医院,盐城城南医院

【出处】

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山东医药

【发表日期】

：

2011年50期

【关键词】

：

iASPP基因 RNA干扰寡核苷酸序列基因转染

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目的构建针对iASPP基因的短发卡RNA干扰（iASPP-shRNA）质粒，并转染胃癌细胞AGS（p53野生型）。方法以iASPP为靶基因设计两条带有短发卡结构的寡核苷酸序列，连接到pGenesil-2．1载体，转化感受态大肠杆菌DH5a，提取质粒转染胃癌细胞并培养形成稳定的细胞系，PCR检测转染AGS细胞中的iASPP基因。结果构建的pGenesil-2．1-iASPP—shRNA质粒测序证实iASPP基因序列完全正确，该质粒转染AGS细胞后，其iASPP基因表达受抑制。结论成功构建了pGenesil-

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