高迁移组染色体蛋白-17的分离提取及其抗体ELISA测定方法的建立

来源 :南京大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiaxing19871215
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纯化高迁移组染色体蛋白-17(HMG-17),建立检测抗HMG-17自身抗体的ELISA方法,探讨抗HMG-17抗体与临床疾病的关系。用水煮沸法提取,甲酸-吡啶缓冲液酸化和SephadexG-150凝胶过滤技术,自小牛胸腺组织中分离HMG-17,用此纯化物包被,方阵滴定,建立测定抗HMG-17抗体的间接ELISA方法,并进行方法学考核和临床标本检测。纯化的HMG-17抗原经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,呈现一条分子量约9200的蛋白带;建立的ELISA方法批内平均变异系数(CV)为5.8%,批间CV值为9.6%,ELISA抑制试验最高抑制率达87.2%;临床检测结果表明,在系统性红斑狼疮(SLE)、混合性结缔组织病(MCTD)和干燥综合征(SS)患者中分别有17.4%~37.3%的抗HMG-17抗体的阳性检出率(P<0.01或P<0.05),而在其他自身免疫病和内科疾病者中,抗HMG-17抗体均为低水平。抗HMG-17抗体ELISA测定法具有较好的特异性和重复性,便于常规检测,该类抗体的存在似与某些自身免疫病(尤其是SLE)的关系较为密切
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