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锌α2糖蛋白真核表达载体的构建和体外表达鉴定

来源 :中国医学科学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xy479977530

【摘要】

：

目的构建小鼠锌α2糖蛋白(mZAG)真核表达载体,在体外培养细胞中鉴定其mRNA和蛋白水平表达。方法提取小鼠肝组织总RNA,采用RT-PCR法扩增mZAG全基因表达序列,酶切法将mZAGcDNA

【作者】

：

张韶君龚凤英邓洁英朱惠娟潘慧张殿喜李乃适

【机构】

：

中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院内分泌科卫生部内分泌重点实验室

【出处】

：

中国医学科学院学报

【发表日期】

：

2010年3期

【关键词】

：

锌α2糖蛋白 3T3-L1细胞小干扰RNA 质粒构建 Zinc-α2-glycoprotein 3T3-L1 preadipocytes small inte

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目的构建小鼠锌α2糖蛋白(mZAG)真核表达载体,在体外培养细胞中鉴定其mRNA和蛋白水平表达。方法提取小鼠肝组织总RNA,采用RT-PCR法扩增mZAG全基因表达序列,酶切法将mZAGcDNA全序列插入表达质粒载体pcDNA3.1(-)中构建pcDNA3.1(-)-mZAG真核表达质粒。采用阳离子脂质体转染法将不同浓度mZAG表达质粒(0、0.4、0.8、1.6μg)pcDNA3.1(-)-mZAG和4对mZAG小干扰RNA(siRNA)序列转染到3T3-L1前脂肪细胞中,实时荧光定量RT-PCR测定m

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