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目的探讨磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路在缺氧血管内皮细胞凋亡中的作用。方法 (1)常规培养人血管内皮细胞株EA.hy926细胞,取部分人血管内皮细胞株EA.hy926按照随机数字表法分为两组:正常对照组:置于气体成分体积分数5%二氧化碳培养箱中常规培养;缺氧组:置于气体成分体积分数1%氧气、5%二氧化碳和94%氮气的三气培养箱中进行缺氧培养。采用蛋白质印迹法检测正常对照组内皮细胞和缺氧处理3、6、24 h的内皮细胞中Akt活化状态(以p Akt/Akt值表示),流式细胞仪检测细胞凋亡率。(2)另取部分人血管内皮细胞株EA.hy926按照随机数字表法分为4组:正常对照组,缺氧组:培养方法同前,正常对照+阻断剂组:用含50μmol/L的LY294002(PI3K/Akt阻断剂)的培养液常规培养内皮细胞;缺氧+阻断剂组:用含50μmol/L的LY294002的培养液缺氧处理内皮细胞。均于培养3 h后收集内皮细胞,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率。对Akt活化状态与细胞凋亡率行单因素方差分析和LSD-t检验。结果 (1)正常对照组细胞和缺氧处理3、6、24 h的内皮细胞p Akt/Akt值分别为0.67、0.79、0.34和0.35;正常内皮细胞和缺氧处理3、6、24 h的内皮细胞凋亡率分别为(3.11±0.21)%、(4.57±0.85)%、(6.93±0.58)%、(9.96±2.62)%,组间比较差异有统计学意义(F=8.96,P=0.030)。与正常对照组细胞比较,缺氧处理3、6 h的内皮细胞凋亡率升高,差异无统计学意义(t=1.03、2.70,P=0.360、0.054);缺氧处理24 h的内皮细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义(t=4.99,P=0.008)。(2)正常对照组、正常对照+阻断剂组、缺氧组、缺氧+阻断剂组培养3 h后细胞凋亡率为(2.39±0.50)%、(5.77±1.21)%、(3.76±1.05)%、(19.54±4.85)%,组间比较差异有统计学意义(F=23.47,P<0.05)。与正常对照组比较,正常对照+阻断剂组和缺氧组细胞凋亡率升高,但差异无统计学意义(t=1.35、0.49,P>0.05)。与缺氧组和正常对照+阻断剂组比较,缺氧+阻断剂组细胞凋亡率显著升高,差异有统计学意义(t=6.95、5.88,P<0.05)。结论 PI3K/Akt通路在缺氧内皮细胞损伤中具有抗凋亡作用,对缺氧内皮细胞损伤具有保护作用。