【摘 要】
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目的构建携带人granzyme B基因的真核表达载体,并将其在HeLa细胞中表达. 方法用反转录PCR获取人granzyme B全长cDNA序列,将其活性型序列克隆进pcDNA3重组表达质粒. 脂质体法
【机 构】
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第四军医大学基础部,第四军医大学基础部组织胚胎学教研室
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目的构建携带人granzyme B基因的真核表达载体,并将其在HeLa细胞中表达. 方法用反转录PCR获取人granzyme B全长cDNA序列,将其活性型序列克隆进pcDNA3重组表达质粒. 脂质体法转染HeLa细胞,间接免疫荧光检测目的蛋白表达,HE染色观察其对转染HeLa细胞形态的影响. 结果成功获得了野生型granzyme B cDNA,构建了编码活性型granzyme B的真核表达载体pcDNA3-G. 转染HeLa细胞后观察到目的蛋白表达,转染细胞形态发生变化,出现多核大细胞及固缩小细胞. 结
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