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对新近测定的猪链球菌2型(S.suis2)05ZYH33全基因序列进行生物信息学分析,并与相关家族蛋白进行同源性比较,设计合成引物,PCR法扩增出约1.3kb的烯醇化酶编码基因(enolase,eno),将其克隆入pMD-18T载体中,进一步亚克隆入表达载体pET32a。将重组表达质粒pET32a::eno转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,SDS—PAGE初步检测到分子量约为75kD的蛋白带。通过His—Tag亲和层析纯化,获得融合蛋白His—ENO。Western—blot表明