芥子酸拮抗同型半胱氨酸诱导的血管内皮细胞凋亡及焦亡

来源 :山西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mgqzhineng
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目的研究同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)对casepase途径介导的内皮细胞凋亡和焦亡的促进作用,以及该过程中芥子酸(sinapic acid,SA)对Hcy的拮抗作用。方法分别利用0,0.1,0.3,0.5,1,3,5 mmol/L浓度的Hcy处理HUVEC-12人脐静脉内皮细胞24 h,检测细胞凋亡和细胞焦亡水平,筛选最适处理浓度;以最适浓度Hcy处理细胞24 h,同时分别添加0.1,0.5,1,5,10μmol/L的SA。采用Annexin-Ⅴ/PI法检测早期细胞凋亡,caspase-1 FLICA/PI法检测细胞的焦亡,Western blot检测细胞中焦亡关键调控蛋白NRLP3、ASC、caspase-1,凋亡相关蛋白caspase-8、caspase-3和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,通过ELISA方法检测细胞上清中内皮素(endothelin-1,ET-1)及炎性因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)的分泌量。结果细胞凋亡细胞焦亡水平随Hcy浓度升高而逐渐上升;与对照相比,当Hcy浓度分别≥0.5 mmol/L和≥1 mmol/L时,细胞凋亡和焦亡水平显著升高(P<0.05);3 mmol/L和5 mmol/L Hcy进一步促进细胞的凋亡、焦亡及相关调控蛋白的水平(P<0.05);选择3 mmol/L为最适浓度,用于后续研究。1μmol/L SA可以抑制上述改变并能拮抗Hcy诱导的ET-1和IL-1β的分泌(P<0.05),并且其拮抗作用跟泛caspase抑制剂Z-VAD-FMK的效果类似。结论 Hcy可通过casepases途径诱导血管内皮细胞的凋亡和焦亡;低浓度的SA可拮抗Hcy诱导的血管内皮细胞凋亡和焦亡。
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