【摘 要】
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目的 研究丹参酮ⅡA对人喉癌细胞顺铂耐药的影响作用及机制。方法 以不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期人喉癌Hep-2细胞和人喉癌顺铂耐药细胞（Hep-2/DDP）48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率，计算半数抑制浓度(IC50)和耐药指数（RI）。以不同质量浓度（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L）丹参
【基金项目】
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邯郸市科学技术研究与发展计划项目（21422083142）；
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目的 研究丹参酮ⅡA对人喉癌细胞顺铂耐药的影响作用及机制。方法 以不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期人喉癌Hep-2细胞和人喉癌顺铂耐药细胞（Hep-2/DDP）48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率，计算半数抑制浓度(IC50)和耐药指数（RI）。以不同质量浓度（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0 mg/L）丹参酮ⅡA干预对数生长期Hep-2细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率，计算IC50；采用丹参酮ⅡA(IC505.32mg/L)+不同质量浓度（0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0 mg/L）顺铂干预对数生长期Hep-2/DDP细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率，计算2种药物联用的IC50和逆转倍数（RF）。取对数生长期Hep-2/DDP细胞，设置对照组、顺铂组、丹参酮ⅡA+顺铂组、丹参酮ⅡA+顺铂+胰岛素样生长因子-1（IGF-1）组。各组分别给药干预48 h后，采用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞增殖抑制率和凋亡率，Western blotting法检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）、激活型半胱氨酸蛋白酶-3（cleaved Caspase-3）、cleaved Caspase-9、磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、p-PI3K、蛋白激酶B（Akt）蛋白表达情况。结果 顺铂对Hep-2细胞的IC50为4.58 mg/L，对Hep-2/DDP细胞的IC50为14.09 mg/L,RI为3.08；丹参酮ⅡA对Hep-2细胞的IC50为5.32 mg/L；丹参酮ⅡA联合顺铂对Hep-2/DDP细胞的IC50为3.34 mg/L,RF为4.22。与对照组比较，顺铂组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高（P＜0.01）；与顺铂组比较，丹参酮ⅡA+顺铂组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著升高（P＜0.05）；与丹参酮ⅡA+顺铂组比较，丹参酮ⅡA+顺铂+IGF-1组Hep-2/DDP细胞增殖抑制率、凋亡率显著降低（P＜0.05）。与对照组相比，顺铂组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著降低，Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著升高（P＜0.05）。与顺铂组比较，丹参酮ⅡA+顺铂组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著降低，Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著升高（P＜0.05）。与丹参酮ⅡA+顺铂组比较，丹参酮ⅡA+顺铂+IGF-1组Hep-2/DDP细胞Bcl-2表达量显著升高，Bax、cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9表达量和Bax/Bcl-2值显著降低（P＜0.05）。与对照组相比，顺铂组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化（pPI3K/PI3K、p-Akt/Akt）水平显著降低（P＜0.05）。与顺铂组比较，丹参酮ⅡA+顺铂组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化水平显著降低（P＜0.05）。与丹参酮ⅡA+顺铂组比较，丹参酮ⅡA+顺铂+IGF-1组Hep-2/DDP细胞p-PI3K、p-Akt表达量及PI3K、Akt磷酸化水平显著升高（P＜0.05）。结论 丹参酮ⅡA可逆转人喉癌细胞顺铂耐药，其作用机制可能与抑制PI3K/Akt通路活化而促进喉癌细胞凋亡有关。
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