条斑紫菜TPS基因0.6Kb片段的原核表达及抗血清的制备

来源 :青岛农业大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：zzqeng

【摘要】

：

以pET22b为起始载体,构建了条斑紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因（PyTPS）0.6Kb片段的原核表达载体,并命名为pET22b-PyTPS0.6.重组菌BL21 （pET22b-PyTPS0.6）经ITPG诱导后,SDS-PAGE分析

【作者】

：

孟庆芹王斌徐丽娟孙牧君郭宝太

【机构】

：

青岛农业大学生命科学学院

【出处】

：

青岛农业大学学报(自然科学版)

【发表日期】

：

2013年4期

【关键词】

：

PyTPS基因原核表达镍离子亲和层析重组蛋白抗血清 PyTPS gene prokaryotic expression nickel ion affin

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以pET22b为起始载体,构建了条斑紫菜6-磷酸海藻糖合成酶基因（PyTPS）0.6Kb片段的原核表达载体,并命名为pET22b-PyTPS0.6.重组菌BL21 （pET22b-PyTPS0.6）经ITPG诱导后,SDS-PAGE分析显示菌体总蛋白的电泳图谱上有分子量约为23kDa的特异性蛋白条带,即PyTPS基因0.6Kb片段得到了原核表达.用溶菌酶裂解细菌提取包涵体,再利用镍离子亲和层析柱从包涵体中纯化出TPS重组蛋白.用获得的高纯度重组蛋白作抗原免疫家兔获得了抗血清,间接ELISA测定显示一份抗血

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