【摘 要】
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Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是一种Ⅰ型跨膜蛋白,广泛表达于哺乳动物细胞表面,在抗感染免疫中发挥重要作用。为探讨TLR4基因在大肠杆菌(Escherichia coli)引起的
【机 构】
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甘肃农业大学动物医学院; 甘肃农业大学动物科学技术学院; 甘肃省草食动物生物技术重点实验室;
【基金项目】
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甘肃省高等学校基本科研业务费项目;甘肃省农业生物技术研究与应用与开发项目(No.GNSW-2011-22);甘肃农业大学动物医学院教研产学创新基金(No.GYCX-KX010)
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Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)是一种Ⅰ型跨膜蛋白,广泛表达于哺乳动物细胞表面,在抗感染免疫中发挥重要作用。为探讨TLR4基因在大肠杆菌(Escherichia coli)引起的小尾寒羊(Ovis aries)乳房炎的乳腺组织中的表达情况,本实验以大肠杆菌(O113型)人工感染小尾寒羊乳房,建立乳房炎病理模型,采用q RT-PCR检测TLR4基因在正常乳腺组织和感染大肠杆菌后乳腺组织中的相对表达量,用蛋白免疫印迹(Western blot,WB)和免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)SP法研究了正常乳腺组织和感染大肠杆菌后乳腺组织中TLR4蛋白的表达量和组织内分布。结果显示,正常乳腺组织和感染大肠杆菌后乳腺组织中均有TLR4的表达,而感染后48 h时TLR4 m RNA和蛋白相对表达量最高,96 h时TLR4m RNA和蛋白相对表达量显著低于48 h(P<0.05),正常对照组TLR4的相对表达量最低(P<0.05)。免疫组织化学染色发现,正常乳腺组织和感染大肠杆菌后的乳腺组织中乳腺腺泡上皮均有TLR4阳性表达,与对照组相比,感染后阳性表达明显增强(P<0.05)。本研究结果表明,小尾寒羊感染大肠杆菌后乳腺组织中TLR4的表达明显上调,这为进一步研究TLR4在绵羊乳房炎发病过程中的作用机制提供了基础资料。
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