Ⅰ型单纯疱疹病毒胸苷激酶真核表达载体的构建及其表达鉴定

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【摘要】

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为构建单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶（HSV1TK）的真核表达载体pcDNA3．1-EGFP／HSV1TK，鉴定其在真核细胞中的表达和功能。以pORF—HSV1TK为模板，PCR扩增的目的基因HSy，TK片段与pMD18-T载体

【作者】

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樊萍杨竹胡接力崔静汤雄文王露颖甘胜伟

【机构】

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重庆医科大学附属第二医院妇产科,重庆医科大学感染性疾病重点实验室,重庆医科大学解剖教研室

【出处】

：

生物技术通报

【发表日期】

：

2009年7期

【关键词】

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自杀基因胸苷激酶/丙氧鸟苷真核表达载体旁观者效应卵巢癌 Suicide gene HSV1TK/GCV Eukaryotic co-expression

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为构建单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激酶（HSV1TK）的真核表达载体pcDNA3．1-EGFP／HSV1TK，鉴定其在真核细胞中的表达和功能。以pORF—HSV1TK为模板，PCR扩增的目的基因HSy，TK片段与pMD18-T载体相连接构建重组克隆pMD18-T／HSV1TK。再双酶切出HSV1TK片段，插入pcDNA3．1-EGFP多克隆位点，构建pcDNA3．1-EGFP／HSV1TK真核表达载体并进行酶切、测序鉴定。分别用荧光显微镜观察和RT—PCR方法检测脂质体介导pcDNA3．1-EGFP／HSV1TK

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