【摘 要】
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目的 探讨全反式维甲酸(all-transretinoic acid,ATRA)对缺氧复氧小鼠巨噬细胞RAW264.7的保护作用及其机制.方法 体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,制备缺氧复氧模型,将细胞随
【机 构】
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南方医科大学附属花都医院广州市花都区人民医院肾病学科,广州,510800
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目的 探讨全反式维甲酸(all-transretinoic acid,ATRA)对缺氧复氧小鼠巨噬细胞RAW264.7的保护作用及其机制.方法 体外培养小鼠巨噬细胞系RAW264.7,制备缺氧复氧模型,将细胞随机分为3组:(1)对照组:不做任何处理;(2)模型组:单纯制备缺氧复氧模型;(3)维甲酸组:在细胞进行缺氧复氧处理之前,加入10 μmol/L ATRA.在倒置显微镜下观察各组细胞的形态,利用逆转录聚合酶链式反应、免疫印迹法和免疫荧光法检测各组细胞过氧化物酶体增值激活物受体-γ(peroxisome proliferators-activated receptors-γ,PPAR-γ)、巨噬细胞亚型M1标志物诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和M2标志物白细胞分化抗原206(CD206)的表达.结果 倒置显微镜下可见ATRA组的细胞较模型组数量增加,细胞生长状态改善.与模型组相比,维甲酸组iNOS免疫荧光强度,mRNA和蛋白表达水平下降(P<0.01);CD206和PPAR-γ免疫荧光强度,mRNA和蛋白表达水平升高(P<0.01).结论 ATRA通过调控小鼠RAW264.7巨噬细胞内iNOS、CD206和PPAR-γ的表达,促进M1向M2分化,进而减轻缺氧复氧损伤.
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