【摘 要】
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3-脱氧葡糖醛酮(3-deoxyglucosone)是美拉德反应的主要中间产物,对生物体具有毒性作用.用硫酸铵分部沉淀、DEAE-cellulose 52、 Hydroxyapatite、DEAE-Sepharose CL-6B柱层析
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3-脱氧葡糖醛酮(3-deoxyglucosone)是美拉德反应的主要中间产物,对生物体具有毒性作用.用硫酸铵分部沉淀、DEAE-cellulose 52、 Hydroxyapatite、DEAE-Sepharose CL-6B柱层析从酿酒酵母YBr-M(S.cerevisiae YBr-M)抽提液中分离纯化了3-脱氧葡糖醛酮代谢酶(以NADPH为辅酶).该酶是单一的分子,分子量为44 kD,反应最适pH为7.0,pH6.0～8.0之间酶活性相对稳定,以3-脱氧葡糖醛酮为底物的米氏常数Km为2.25 mmol/L.在35℃以下保温30 min酶活不变,50℃保温30 min后酶活损失50%.该酶对二羰基化合物的活性较高,对单羰基化合物则较低,其催化作用受碘乙酸、N-乙基顺丁烯二酰亚胺的抑制,而被β-巯基乙醇、二硫苏糖醇激活,催化作用必须以NADPH为专一辅酶,当用NADH代替NADPH时,活力只有5.3%.
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