烟草浸提液对成骨细胞生物学性能的影响

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目的研究不同浓度烟草浸提液(smokeless tobacco extract,STE)对成骨细胞生物学性能的影响,探讨吸烟影响种植体骨结合的病理机制。方法以0(对照组)、0.01、0.1、1、5、10g/L的STE作用于小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14(MC3T3-E1Subclone 14,MC3T3),MTT法检测在STE作用1、3、5、7d后的增殖情况,罗丹明及DAPI染色后以激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope)观察MC3T3细胞骨架(cytoskeleton)在STE作用24h后的形态变化,荧光实时定量PCR(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和核心结合因子α1(Cbfα1)mRNA在STE作用48h后的表达。结果 MTT试验显示0.01~10g/L的STE可抑制MC3T3增殖(P<0.05),5~10g/L的STE可随时间延长抑制MC3T3增殖(P<0.05)。细胞骨架观察显示对照组细胞骨架呈网络状铺展,在STE刺激下微丝解聚,细胞骨架重排且随浓度升高作用更加明显。RT-qPCR结果显示5~10g/L的STE可促进MC3T3的IL-6mRNA表达(P<0.05),0.1~10g/L的STE可抑制MC3T3的Cbfα1mRNA表达(P<0.05),随STE浓度升高,作用更加明显。结论烟草可抑制成骨细胞增殖,影响细胞骨架结构,增高MC3T3细胞IL-6mRNA的表达和降低其Cbfα1mRNA的表达,从而抑制成骨细胞的分化及附着,提示吸烟不利于骨结合。
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