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目的：建立以反相高效液相色谱法测定两性霉素B阴道泡腾片中主药含量的方法。方法：色谱柱为Kromasil C18，流动相为0．01mol·L^-1磷酸二氢钾-乙腈（66：34），检测波长为408nm，进样量为10μL，流速为1．0mL·min^-1柱温为室温。结果：两性霉素B进样量的线性范围为0．404-3．636μg（r=0．9994）；平均回收率为99．39％，RSD=0．22％（n=6）。结论：本方法操作简单、准确、易行，可用于该制剂的质量控制。