【摘 要】
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目的 通过研究幽门螺杆菌(Hp)及其培养上清液粗提蛋白(BCF-P)对兔离体胃壁细胞酸分泌的影响,探讨Hp感染引起宿主胃酸分泌状态改变的可能机制。方法 兔胃体黏膜经Ⅰ型胶原酶消化、离心淘洗后获得新鲜分离的壁细胞,并进行短期培养。提取Hp培养上清液粗提蛋白(BCF-P)并进行真空干燥浓缩,HeLa细胞以中性红摄取试验鉴定其细胞空泡活性。兔离体壁细胞与Hp及BCF-P(100μg/ml)分别共孵育2、
【机 构】
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100730,中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院消化科,100730,中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院消化科,100730,中国医学科学院 中国协和医科大学 北京协和医院消化
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目的 通过研究幽门螺杆菌(Hp)及其培养上清液粗提蛋白(BCF-P)对兔离体胃壁细胞酸分泌的影响,探讨Hp感染引起宿主胃酸分泌状态改变的可能机制。方法 兔胃体黏膜经Ⅰ型胶原酶消化、离心淘洗后获得新鲜分离的壁细胞,并进行短期培养。提取Hp培养上清液粗提蛋白(BCF-P)并进行真空干燥浓缩,HeLa细胞以中性红摄取试验鉴定其细胞空泡活性。兔离体壁细胞与Hp及BCF-P(100μg/ml)分别共孵育2、16h和1、12h,应用14C-氨基比林(14C-AP)摄取法测定Hp和BCF-P对组胺(1.0×10-4mol/L)刺激的壁细胞酸分泌的影响;同时应用RT-PCR方法分析Hp和BCF-P对壁细胞H+-K+ATP酶α亚基mRNA表达的影响。结果 (1)BCF-P中含有细胞空泡毒素(VacA),对HeLa细胞表现出细胞空泡活性。(2)与Hp共孵育2h和16h均能抑制组胺刺激的壁细胞酸分泌(P<0.05),抑制作用随孵育时间延长而增强,2h抑制率为81%,16h为94%;BCF-P作用1h和12h,均能抑制壁细胞酸分泌(P<0.05),抑制作用也随孵育时间延长而增强,1h抑制率为24%,12h为58%。(3)尽管与Hp孵育2h能上调壁细胞H+-K+ATP酶α亚基mRNA表达(P<0.05),但孵育16h则表现为下调其表达(P<0.05);BCF-P作用1h和12h,均抑制H+-K+ATP酶α亚基mRNA的表达(P<0.05)。结论 Hp及其分泌的VacA可能通过下调壁细胞H+-K+ATP酶表达水平来抑制组胺刺激的壁细胞酸分泌。
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